Микобактерии, ДНК (Mycobacterium tuberculosis complex, ПЦР) соскоб, кач. в Краснодаре

Подробное описание исследования

Исследование направлено на диагностику туберкулеза дыхательных путей — мультисистемного заболевания с множеством проявлений, которое является наиболее распространенной причиной смертности от инфекционных заболеваний во всем мире. По данным ВОЗ, в 2015 году было зафиксировано 1,4 млн случаев смерти от туберкулеза, среди которых 0,4 млн человек имели ВИЧ.

Россия входит в число стран с наиболее высоким показателем распространенности туберкулеза, хотя в последние 10 лет в этом направлении наблюдается положительная тенденция: снижается число как новых случаев заражения, так и доля носителей из общего числа больных. Как правило, данное заболевание поражает легкие (85% случаев), но может затрагивать и другие органы, в том числе кости. Источниками инфицирования являются больные люди с открытой формой заболевания — выделяющие возбудителя в окружающую среду со слюной.

Симптомами заболевания являются:

1. Потеря веса/анорексия;
2. Потеря аппетита;
3. Обильная потливость в ночное время;
4. Высокая температура;
5. Общая слабость.

Если речь идет о легочной форме заболевания, симптомы могут включать:

1. Кашель;
2. Кровохарканье (кашель с кровью);
3. Боль в груди.

При внелегочной форме симптомы будут зависеть от области поражения.

Mycobacterium tuberculosis complex — общее название близкородственных бактерий, которые являются возбудителями туберкулеза. Они имеют множество факторов патогенности, которые позволяют им долго выживать в окружающей среде и избегать иммунного ответа. Микобактерия туберкулеза является внтуриклеточным паразитом, тем самым, будучи поглощенной клетками иммунной системы, возбудитель инактивирует ферменты данных клеток, оставаясь жизнеспособной. Благодаря этим свойствам микобактерий туберкулез — достаточно опасное заболевание, особенно для людей с ослабленным иммунитетом. Заражение происходит, как правило, воздушно-капельным путем, когда инфицированный человек чихает или кашляет, в редких случаях для заражения достаточно даже разговора с больным. Также туберкулез может передаться даже от беременной женщины плоду еще в утробе.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод исследования, позволяющий обнаружить ДНК возбудителя в биоматериале даже в небольшом количестве. ПЦР на M. Tuberculosis, согласно международным клиническим рекомендациям, не является стандартом диагностики данного заболевания. Данный тест используется в качестве дополнительного. «Золотой стандарт»: Проба Манту, T-SPOT, диаскин или квантифероновый тест.

Mycobacterium tuberculosis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Исследование для выявления возбудителя туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) микобактерии в образце биоматериала.

Синонимы русские

Туберкулез, микобактерии туберкулеза, палочка Коха.

Синонимы английские

Tuberculosis, Tubercle bacillus, Koch’s bacillus.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Биоптат, венозную кровь, ликвор, мокроту, плевральную жидкость, первую порцию утренней мочи, эякулят.

Общая информация об исследовании

Туберкулез (от лат. tuberculum – «бугорок») – инфекционное заболевание человека и животных, передающееся преимущественно воздушно-капельным путем. Риск заразиться повышает подавление иммунитета, вызванное ВИЧ/СПИДом, диабетом, заболеванием почек, трансплантацией органов и применением иммуносупрессоров, беременностью, старением. Кроме того, наиболее подвержены ему те, кто контактирует с больными туберкулезом, а также дети до 5 лет после виража туберкулиновой пробы. К наиболее уязвимым группам населения относят бездомных, заключенных, мигрантов из стран с высокой заболеваемостью туберкулезом, наркопотребителей, а также пожилых людей.

Для данного исследования используется тест-система, основанная на выявлении геномной ДНК возбудителя туберкулеза с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (реал-тайм ПЦР). В современной диагностике это один из самых быстрых, универсальных и высокочувствительных методов.

Стандартные способы обнаружения микобактерий туберкулеза базируются на выращивании патогенных микроорганизмов в питательной среде. Сложности связаны с низкой скоростью роста колоний Mycobacterium tuberculosis – необходимо ожидать до 1,5 месяцев после взятия материала.

Высокой чувствительностью и специфичностью обладают молекулярно-биологические методы, основанные на детекции генетического материала микобактерий туберкулеза. Их важнейшим преимуществом является высокая скорость получения результата. Использование ПЦР реал-тайм позволяет выявить возбудитель туберкулеза уже в день получения клинического образца.

Бактериемия (попадание в кровь пациента микобактерий) может возникать на ранних стадиях туберкулезной инфекции, а также при развитии генерализованного или внелегочного туберкулеза. Она опасна тем, что иммунный ответ на бактерии вызовет сепсис и септический шок, чреватый смертью. Риск развития генерализованного туберкулеза наиболее высок у пациентов с ВИЧ на поздних стадиях, у тех, кто прервал противотуберкулезную терапию, а также у не обратившихся вовремя за медицинской помощью при появлении симптомов туберкулеза.

Диагностика туберкулеза у ВИЧ-инфицированных затруднена из-за иммуносупрессированного состояния организма, что зачастую проявляется в ложноотрицательных результатах туберкулиновых реакций и микробиологических тестов. В связи с этим тестирование на Mycobacterium tuberculosis методом ПЦР реал-тайм имеет большое значение.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики туберкулеза легких (в частности, его генерализованных и внелегочных, связанных с бактериемией, форм), и контроля за его лечением.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на внелегочный туберкулез.
• При симптомах бактериемии на фоне туберкулезной инфекции: повышенной температуре тела, потливости и пр. (при небольшом количестве бактерий в крови бактериемия может протекать бессимптомно).
• Если у пациента был длительный контакт с больным туберкулезом.
• При ненормальной реакции на туберкулиновую пробу у детей.
• Когда у пациента ВИЧ-инфекция.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Положительный результат

• Наличие возбудителя в исследуемом биоматериале. Это обычно встречается при активной форме туберкулеза, требующей лечения. Выявление большого количества микобактерий чаще всего указывает на внелегочную форму туберкулеза либо генерализацию инфекции.

Отрицательный результат

• Возбудителя туберкулеза не выявлено. Бактериемия отсутствует.

Что может влиять на результат?

Эффективная противотуберкулезная терапия со временем приводит к исчезновению микобактерий в клиническом материале.



Важные замечания

• Для назначения корректной схемы лечения при выявлении у пациента туберкулеза необходимо провести тест на чувствительность микобактерий к противотуберкулезным препаратам.

Также рекомендуется

• Mycobacterium tuberculosis, антитела
• Mycobacterium tuberculosis complex, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Кто назначает исследование?

Врач общей практики, терапевт, фтизиатр, уролог, гинеколог, инфекционист.

Использованная литература

1. Скорняков, С.Н., Шульгина, М.В., Ариэль, Б.М. и др. Клинические рекомендации по этиологической диагностике туберкулеза, 2014. — С. 39-58.
2. Национальная ассоциация фтизиатров: Клинические рекомендации по диагностике и лечению туберкулеза органов дыхания у взрослых, 2013. — 38 с.
3. Черноусова, Л.Н., Севастьянова, Э.В., Ларионова, Е.Е. и др. Федеральные клинические рекомендации по организации и проведению микробиологической и молекулярно-генетической диагностики туберкулеза , 2014. — 36 с.
4. Туберкулез в Российской Федерации 2011. Аналитический обзор статистических показателей, используемых в Российской Федерации и в мире. — М., 2003.
5. World health organization : web site / WHO: The Stop TB Strategy, 2021, — URL: https://www.who.int/tb/strategy/stop_tb_strategy/en/National Center for
6. National Center for HIV/AIDS, Viral Hepatitis, STD, and TB Prevention. Division of Tuberculosis Elimination.Tuberculosis Disease FactSheets : web site, 2021. — URL: https://www.cdc.gov/tb/publications/factsheets/testing/diagnosis.htm
7. Peter, J., Green, C., Hoelscher, M. et al. Urine for the diagnosis of tuberculosis: current approaches, clinical applicability, and new developments. Curr Opin Pulm Med., 2010. — Vol.16(3). — P. 262-270.

Mycobacterium tuberculosis complex, ДНК [реал-тайм ПЦР]

Молекулярно-генетическое исследование, позволяющее определить в исследуемом биоматериале наличие ДНК возбудителей туберкулеза – M. tuberculosis и M. bovis.

Синонимы русские

Возбудители туберкулеза, ДНК [реал-тайм ПЦР] (моча, клетки эндометрия матки, эякулят, секрет простаты).

Синонимы английские

Mycobacterium tuberculosis complex, DNA.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Для чего используется этот анализ?

Для диагностики туберкулеза мочеполовой системы и контроля за его лечением.

Когда назначается анализ?

При подозрении на туберкулез.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Клетки эндометрия матки, первую порцию утренней мочи, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), эякулят.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

Туберкулез по сей день является наиболее частой причиной смерти от инфекционных заболеваний у взрослых. Он вызывается человеческим (M. tuberculosis) и бычьим (M. bovis) типом микобактерий. Отличительной особенностью этих бактерий является устойчивость их клеточной стенки к действию кислот, отчего их называют кислотоустойчивыми. Заражение Mycobacterium tuberculosis происходит, как правило, воздушно-капельным путем, а Mycobacterium bovis – алиментарным (через пищевые продукты, в том числе и молоко), возможно заражение контактным путем (через раневую поверхность) и внутриутробно (от больной туберкулезом матери к плоду).

При первичном инфицировании клинические симптомы, как правило, отсутствуют. По мере прогрессирования заболевания появляются усталость, ночная потливость и лихорадка, кашель с мокротой, теряется масса тела. Примерно в 10 % случаев наблюдается активная форма туберкулеза, риск развития которой наиболее высок при ослабленном иммунитете, в том числе при ВИЧ-инфекции, сахарном диабете, терминальной почечной недостаточности, злокачественных опухолях и т. д.

Наиболее быстрым и высокочувствительным методом (чувствительность – 95 %) выявления туберкулеза является полимеразная цепная реакция. Ее принцип основан на амплификации (многократном увеличении числа копий) специфичных для возбудителей туберкулеза участков ДНК.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики туберкулеза – мочеполовой системы, а также легочных форм.
• Для оценки эффективности проводимой противотуберкулезной терапии.
• Для раннего выявления рецидивов туберкулеза.

Когда назначается исследование?

• При симптомах или рентгенологических изменениях, характерных для туберкулеза.
• При бесплодии.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата

• Инфицирование возбудителями туберкулеза.
• Выявление фрагментов ДНК нежизнеспособных микобактерий туберкулёза после эффективной терапии (ложноположительный результат).

Причины отрицательного результата

• Отсутствие инфицированности возбудителями туберкулеза (отсутствие туберкулеза).
• Недостаточное количество возбудителя.

Что может влиять на результат исследования?

• Предшествующая антибактериальная терапия.
• Загрязнение пробы посторонними молекулами ДНК способствует ложноположительному результату, ингибирование полимеразной цепной реакции компонентами биопроб (гемоглобином, гепарином и т. д.) – ложноотрицательному.

Также рекомендуется

• Mycobacterium tuberculosis, антитела
• Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
• Лейкоцитарная формула
• Скорость оседания эритроцитов

Кто назначает исследование?

Фтизиатр, терапевт, педиатр, врач общей практики, уролог, гинеколог.

Литература

1. Кишкун А. А. Руководство по лабораторным методам диагностики / А. А. Кишкун. – М. : ГЭОТАР-Медиа, 2007. – 822 с.
2. Fitzgerald D., Haas D. W. Mycobacterium tuberculosis. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
3. Slaven E. M. Infectious diseases. Emergency department, diagnosis & management / E.M. Slaven, S.C. Stone, F.A. Lopez. – McGraw-Hill’s,