Цитологическое исследование мазков из шейки матки позволяет оценить состояние слизистой оболочки, наличие или отсутствие признаков патологических процессов (реактивных, предопухолевых, опухолей). При выявлении другими лабораторными методами инфекционного агента (вирус папилломы человека, бактериальные и паразитарные инфекции), цитологический метод позволяет оценить реакцию организма на инфекционный агент, наличие или отсутствие признаков повреждения, пролиферации, метаплазии или трансформации эпителия. Возможно также при исследовании мазка определить причину изменений эпителия (наличие воспаления с ориентировочным или уверенным определением патогенной микробиоты (микрофлоры), патологических процессов, связанных с гормональным, лекарственным, механическим, лучевым воздействием на организм женщины и шейку матки, состояний, чреватых опасностью возникновения дисплазии и рака шейки матки, а при их развитии установить правильный диагноз. В связи с этим цитологическое исследование применяют как при скрининге (мазки с визуально нормальной шейки матки), так и при наличии видимых при гинекологическом осмотре изменений слизистой оболочки.
Получение материала
Рак шейки матки чаще всего развивается в зоне трансформации, ему предшествуют фоновые процессы и внутриэпителиальные поражения (дисплазия эпителия), которые могут располагаться на небольших участках, поэтому важно, чтобы материал был получен со всей поверхности шейки матки, особенно из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия. Число измененных клеток в мазке бывает различным, и если их мало, то увеличивается вероятность, что патологические изменения могут быть пропущены при просмотре препарата. Для эффективного цитологического исследования необходимо учитывать:
- при профилактических осмотрах цитологические мазки следует брать у женщин независимо от жалоб, наличия или отсутствия изменений слизистой оболочки. Цитологическое исследование следует повторять не реже, чем раз в три года;
- желательно получать мазки не ранее, чем на 5-е сутки менструального цикла и не позднее, чем за 5 суток до предполагаемого начала менструации;
- нельзя брать материал в течение 48 ч после полового контакта, использования любрикантов, раствора уксуса или Люголя, тампонов или спермицидов, спринцевания, введения во влагалище медикаментов, свечей, кремов, в т. ч. кремов для выполнения ультразвукового исследования;
- беременность – не лучшее время для скрининга, так как возможны неправильные результаты, но, если нет уверенности, что женщина придет на обследование после родов, лучше мазки взять;
- при симптомах острой инфекции желательно получать мазки с целью обследования и выявления патологических изменений эпителия, этиологического агента; также необходим цитологический контроль после лечения, но не ранее, чем через 2 мес. после окончания курса.
Материал из шейки матки должен брать врач-гинеколог или (при скрининге, профилактическом осмотре) хорошо обученная медицинская сестра (акушерка).
Важно, чтобы в мазок попадал материал из зоны трансформации, так как около 90% опухолей исходит из зоны стыка плоского и цилиндрического эпителия и зоны трансформации и только 10% из цилиндрического эпителия цервикального канала.
С диагностической целью материал получают раздельно из эктоцервикса (влагалищной порции шейки матки) и эндоцервикса (цервикального канала) с помощью шпателя и специальной щетки (типа Cytobrush). При проведении профилактического осмотра используют Cervex-Brush, различные модификации шпателя Эйра и другие приспособления для получения материала одновременно из влагалищной части шейки матки, зоны стыка (трансформации) и цервикального канала.
Перед получением материала шейку матки обнажают в “зеркалах”, дополнительных манипуляций не проводят (шейку не смазывают, слизь не удаляют; если слизи много – ее аккуратно снимают ватным тампоном, не надавливая на шейку матки.). Щетку (шпатель Эйра) вводят в наружный зев шейки матки, осторожно направляя центральную часть приспособления по оси цервикального канала. Далее ее наконечник поворачивают на 360° (по часовой стрелке), достигая тем самым получения достаточного числа клеток из эктоцервикса и из зоны трансформации. Введение инструмента выполняют очень бережно, стараясь не повредить шейку матки. Затем щетку (шпатель) выводят из канала.
Как берут мазок из уретры
Забор мазка из уретры проводится двумя способами:
- Ложка Фолькмана вводится в уретру на несколько сантиметров, делается соскоб эпителиальных клеток путём прижимания аппликатора к стенкам уретры и вращая его в разные стороны. Это довольно болезненная процедура, если имеется травма или воспаление мочеиспускательного канала.
- При сильных выделениях размещать ложку Фолькмана внутрь уретры не нужно. Достаточно надавить а переднюю стенку влагалища, чтобы содержимое мочеиспускательного канала вышло наружу. Затем оно собирается аппликатором и помещается в пробирку.
Приготовление препаратов
Перенос образца на предметное стекло (традиционный мазок) должен происходить быстро, без подсушивания и потери прилипших к инструменту слизи и клеток. Обязательно перенести на стекло материал с обеих сторон шпателя или щетки.
Если предполагается приготовление тонкослойного препарата с помощью метода жидкостной цитологии, головку щетки отсоединяют от ручки и помещают в контейнер со стабилизирующим раствором.
Фиксация мазков
выполняется в зависимости от предполагаемого метода окрашивания.
Окрашивание по Папаниколау и гематоксилин-эозином наиболее информативны в оценке изменений эпителия шейки матки; любая модификация метода Романовского несколько уступает этим методам, однако при наличии опыта позволяет правильно оценить и характер патологических процессов в эпителии и микрофлору.
Клеточный состав мазков представлен слущенными клетками, находящимися на поверхности эпителиального пласта. При адекватном получении материала с поверхности слизистой оболочки шейки матки и из цервикального канала в мазок попадают клетки влагалищной порции шейки матки (многослойный плоский неороговевающий эпителий), зоны стыка или трансформации (цилиндрический и, при наличии плоскоклеточной метаплазии, метаплазированный эпителий) и клетки цервикального канала (цилиндрический эпителий). Условно клетки многослойного плоского неороговевающего эпителия принято делить на четыре типа: поверхностные, промежуточные, парабазальные, базальные. Чем лучше выражена способность эпителия к созреванию, тем более зрелые клетки попадают в мазок. При атрофических изменениях на поверхности эпителиального пласта расположены менее зрелые клетки.
Виды тестов
Сейчас применяется два способа исследования. Главным отличием между ними является разная эффективность.
ПАП-тест
ПАП-тест – это процедура исследования биологического материала, взятого с наружного маточного зева и непосредственно из шейки матки. Материал окрашивается по способу, разработанному Папаниколау. При соблюдении методики проведения анализа ПАП-тест имеет высокие показатели достоверности. С его помощью можно обнаружить предраковые состояния и атипичные клетки во взятом материале.
Зачастую исследуют биологический материал, который был получен с использованием специальной цитощетки и зафиксирован на стекле спиртом.
Такое исследование, кроме предраковых состояний, определяет наличие инфекции.
Жидкостная цитология
Жидкостная цитология – относительно новый способ диагностики онкологии шейки матки. Основное отличие этого анализа от традиционного заключается в том, что при жидкостной цитологии сбор биоматериала производится на жидкой основе. Его не переносят на стекло и не размазывают.
Уже многократно доказано, что жидкостная цитология гораздо точнее и чувствительнее, чем ПАП-тест. Основным преимуществом жидкостного способа является то, что он позволяет собрать намного больше клеток для дальнейшего микроскопического анализа. К тому же метод предполагает использование этого же материала и для других тестов, например, генетического тестирования вируса папилломы человека.
Интерпретация результатов цитологического исследования
Наиболее распространенная в настоящее время – классификация Bethesda (The Bethesda System), разработанная в США в 1988 г, в которую вносили несколько изменений. Классификация создана для более эффективной передачи информации из лаборатории врачам клинических специальностей и обеспечения стандартизации лечения диагностированных нарушений, а также последующего наблюдения за больными.
В классификации Bethesda выделяют плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой и высокой степени (squamous intraepithelial lesions of low grade and high grade – LSIL и HSIL) и инвазивный рак. Плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой степени включают изменения, связанные с папилломавирусной инфекцией и слабой дисплазией (CIN I), высокой степени – умеренную дисплазию (CIN II), тяжелую дисплазию (CIN III) и внутриэпителиальный рак (cr in situ). В этой классификации имеются также указания на специфические инфекционные агенты, вызывающие заболевания, передавае мые половым путем.
Для обозначения клеточных изменений, которые трудно дифференцировать между реактивными состояниями и дисплазией предложен термин ASCUS – atypical squamous cells of undetermined significance (клетки плоского эпителия с атипией неясного значения). Для клинициста этот термин мало информативен, однако он нацеливает врача на то, что данная пациентка нуждается в обследовании и/или в динамическом наблюдении. В классификацию Bethesda в настоящее время введен также термин NILM – no intraepithelial lesion or malignancy, объединяющий норму, доброкачественные изменения, реактивные изменения.
Так как данные классификации используются в практике врача-цитолога, ниже приведены параллели между классификацией Bethesda и классификацией, распространенной в России (Табл. 22). Цитологическое стандартизованное заключениепо материалу из шейки матки (форма № 446/у), утверждено приказом Минздрава России от 24.04.2003 № 174.
Причины получения неполноценного материала различны, поэтому цитолог перечисляет типы клеток, обнаруженные в мазках и по возможности указывает причину, по которой материал признан неполноценным.
Цитологические изменения в железистом эпителии
| Bethesda Терминология, разработанная в г. Bethesda (США, 2001 г.) | Терминология, принятая в России |
| ОЦЕНКА КАЧЕСТВА МАЗКА | |
| Материал полноценный | Материал адекватный (дается описание клеточного состава мазка) |
| Материал недостаточно полноценный | Материал недостаточно адекватный (дается описание клеточного состава мазка) |
| Неудовлетворительный для оценки | Клеточного состава недостаточно для уверенного суждения о характере процесса |
| Удовлетворительный для оценки, но ограниченный чем-то (определить причину) | |
| В пределах нормы Метаплазия (норма) | Цитограмма без особенностей (в пределах нормы) – для репродуктивного возраста Цитограмма с возрастными изменениями слизистой оболочки: — атрофический тип мазка — атрофический тип мазка c лейкоцитарной реакцией Эстрогенный тип мазка у женщины в постменопаузе Атрофический тип мазка у женщины репродуктивного возраста |
| ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ КЛЕТОК | |
| Инфекции | |
| Trichomonas vaginalis | Трихомонадный кольпит |
| Грибы, морфологически сходные с родом Candida | Обнаружены элементы гриба типа Candida |
| Кокки, гонококки | Обнаружены диплококки, расположенные внутриклеточно |
| Преобладание коккобациллярной флоры | Флора коккобациллярная, возможно, бактериальный вагиноз |
| Бактерии, морфологически сходные с Actinomyces | Флора типа Актиномицетов |
| Прочее | Флора типа Leptotrichia |
| Флора – мелкие палочки | |
| Флора – смешанная | |
| Клеточные изменения, связанные с вирусом Herpes simplex | Эпителий с изменениями, связанными с Herpes simplex |
| Возможно, хламидийная инфекция | |
| Реактивные изменения | |
| Воспалительные (включая репаративные) | Найденные изменения соответствуют воспалению с реактивными изменениями эпителия:дегенеративные, репаративные изменения, воспалительная атипия, плоскоклеточная метаплазия, гиперкератоз, паракератоз, и/или др. |
| Атрофия с воспалением (атрофический | Атрофический кольпит Атрофический тип мазка, лейкоцитарная реакция Эпителий слизистой оболочки с гиперкератозом Эпителий слизистой оболочки с паракератозом Эпителий слизистой оболочки с дискератозом Резервноклеточная гиперплазия Плоскоклеточная метаплазия Плоскоклеточная метаплазия с атипией |
| Лучевые изменения | Эпителий слизистой оболочки с лучевыми изменениями |
| Изменения, связанные с использованием внутриматочных контрацептивов | |
| ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПЛОСКОГО ЭПИТЕЛИЯ | |
| Клетки плоского эпителия с атипией неясного значения (ASC-US*) Клетки плоского эпителия с атипией неясного значения не исключающие HSIL (ASC-Н) | Найденные изменения трудно дифференцировать между реактивными изменениями эпителия и дисплазией Обнаружены клетки, трактовка которых затруднена (с дискариозом, укрупненными ядрами, гиперхромными ядрами и т.д.) |
| Изменения плоского эпителия (не опухолевые, но достойные динамического наблюдения) | |
| Плоское интраэпителиальное поражение низкой степени (LSIL): папилломавирусная инфекция, слабая дисплазия (CIN I) | Эпителий слизистой оболочки с признаками папилломавирусной инфекции Найденные изменения, возможно, соответствуют слабой дисплазии. |
| Плоское интраэпителиальное поражение высокой степени (НSIL): умеренная, тяжелая дисплазия и внутриэпителиальный рак (CINII, CIN III) | Найденные изменения соответствуют умеренной дисплазии. Найденные изменения соответствуют тяжелой дисплазии. Найденные изменения подозрительны по наличию внутриэпителиального рака. |
| Инвазивный рак | |
| Плоскоклеточный рак | Плоскоклеточный рак Плоскоклеточный рак с ороговением Плоскоклеточный рак из мелких клеток |
| Железистая гиперплазия Найденные изменения соответствуют эндоцервикозу | |
| Атипичные клетки железистого эпителия (возможные предположения): – Неясного значения (AGUS); – подозрительные на неоплазию; – эндоцервикальная аденокарцинома in situ (AIS); – аденокарцинома | Железистая гиперплазия с атипией по типу дисплазии (I, II, III) Аденокарцинома |
| Клетки эндометрия цитологически доброкачественные (у женщины в менопаузе и т. д.) | |
| Аденокарцинома эндометрия Аденокарцинома другой локализации Аденокарцинома без дополнительной характеристики | Аденокарцинома, возможно аденокарцинома эндометрия Аденокарцинома БДУ (без дополнительного уточнения) |
| Другие злокачественные опухоли (по возможности определить нозологическую форму) | |
| Оценка гормонального статуса | |
* при возможности ASCUS должны быть определены как сходные с реактивными, репаративными или предраковыми процессами;
** изменения, связанные с воздействием вируса папилломы человека, ранее обозначаемые как койлоцитоз, койлоцитарная атипия, кондиломатозная атипия, включены в категорию слабо выраженных изменений клеток плоского эпителия;
*** по возможности следует отметить, относятся ли изменения к CIN II, CIN III, есть ли признаки cr in situ;
**** гормональная оценка (проводится только по вагинальным мазкам): – гормональный тип мазка соответствует возрасту и клиническим данным; – гормональный тип мазка не соответствует возрасту и клиническим данным: (расшифровать); – гормональная оценка невозможна в связи с: (указать причину).
Нормальные показатели мазков из уретры
При взятии мазка из уретры норма мазка является таковой:
| Количество эпителиальных клеток | Лейкоциты | Эритроциты | Кандида | Слизь | Состав флоры |
| до 10 | до 5 | до 2 | нет | нет | в малом количестве золотистый стафилококк, синегойная палочка, нейссерия |
- В норме 95% микрофлору уретры должны составлять лактобактерии. Если условно-патогенная микрофлора доминирует, это говорит об ослаблении иммунитета или о болезнях органов малого таза.
- Большое количество плоского эпителия указывает на перенесённые ранее заболевания воспалительного характера (цистит, болезни почек).
- Эритроциты свидетельствуют о сильном отёке, вызванном воспалительном процессе, а также о повреждении мочеиспускательного канала.
- Лейкоциты выше нормы бывают при воспалении, вызванным переохлаждением, падением иммунитета или инфекцией.
- Дрожжи, в частности, кандида, является следствием переноса инфекции из влагалища, когда заболевание достигает серьёзной формы. В норме никаких дрожжей в уретре быть не должно. Как и слизи, появление которой в мочеиспускательном канале указывает на инфицирование.
Чтобы узнать возбудителя инфекции, у пациентки берётся бактериальный посев — лабораторный анализ, позволяющий найти грамотный антибиотик, к которому имеется хорошая чувствительность.
Интеграция различных лабораторных методов
В диагностике заболеваний шейки матки важное значение имеют клинические данные, результаты исследования на микрофлору (классические микробиологические (культуральные), методы АНК (ПЦР, RT-PCR, Hybrid Capture, NASBA, и др.).
При необходимости уточнения патологического процесса (ASC-US, ASC-H) цитологическое исследование по возможности дополняют молекулярно биологическими (p16, онкогены, метилированная ДНК и др.).
Исследования для обнаружения ВПЧ имеют низкую прогностическую значимость, особенно у молодых женщин (до 30 лет), в связи с тем, что у большинства пациенток этой возрастной группы ВПЧ-инфекция имеет транзиторный характер. Однако несмотря на низкую специфичность теста в отношении интраэпителиальных опухолей и рака, именно у женщин моложе 30 лет он может использоваться в качестве скринингового с последующим цитологическим исследованием. Чувствительность и специфичность значительно увеличиваются при комплексном использовании цитологического метода и исследования для обнаружения ВПЧ, особенно у больных с сомнительными цитологическими данными. Этот тест важен при ведении пациенток с ASC-US, при динамическом наблюдении для определения риска рецидива или прогрессирования заболевания (CIN II, СIN III, carcinoma in situ, инвазивный рак).
Понятие об эпителии матки. Что это такое
Эпителий в мазке, норма у женщин которого составляет 5-10 клеток, классифицируют на 2 вида: однослойный и многослойный. При детальном рассмотрении под микроскопом видно, что ткани первого типа имеют разнообразную форму. Характерной особенностью является то, что их размер примерно одинаковый. Многослойный эпителий в своем составе содержит клетки разной формы с неровными краями.
Главной функцией выстилающей оболочки является защита мочеполовой системы от проникновения в нее патогенных микроорганизмов. Поэтому все ткани между собой плотно соединены, а межклеточное пространство отсутствует.
Жизненный цикл клеток короткий, но за счет того, что они быстро регенерируются, происходит своевременная замена новыми. Если в ходе диагностических или лечебных процедур слой был поврежден, то он также быстро восстанавливается. Помимо защитной функции, эпителий принимает участие в процессе обмена веществ.
Дальнейшие диагностические мероприятия
После получения плохого результата мазка, интерпретация которого указывает на развитие воспалительного или инфекционного заболевания, требуется проведение дополнительной диагностики. В первую очередь женщина должна посетить ведущего гинеколога, который повторно выполнит осмотр.
Далее назначают такие анализы:
- Исследование методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) для определения половых инфекций.
- Бактериологический посев для определения типа возбудителя и его чувствительности к антибиотикам.
- Ультразвуковой скрининг органов малого таза.
Когда все анализы будут сданы, а результаты получены, пациентке снова необходимо посетить гинеколога. Зачастую этого комплекса достаточно для постановки окончательного диагноза и разработки индивидуальной терапевтической схемы.
Состав микрофлоры
Микроорганизмы — это часть организма человека
. Одни из них становятся помощниками, вторые — врагами, третьи — как будто раздумывают, к кому им примкнуть.
Микрофлора женских половых органов — образец подобного противостояния. Более 95% от количества всех населяющих микроорганизмов влагалища — это палочки Додерлейна, или лактобактерии
. Они обеспечивают здоровую микрофлору, вырабатывая молочную кислоту, губительную болезнетворных бактерий, и перекись водорода, обладающую противомикробным действием.
Кто входит в остальные 5%? Удивительно, но это могут быть различные кокки, микоплазмы, гарднереллы, кандиды и другие микроорганизмы
, которые мы привыкли считать болезнетворными. И это норма. Их гармоничное сосуществование гарантирует женщине здоровое состояние. Стоит только снизиться иммунитету, как количество вырабатываемых лактобактерий падает, кислотность среды соответственно уменьшается, а патогенные бактерии начинают усиленно размножаться. Женщина становится уязвимой перед воспалениями и инфекционными заболеваниями.
Уплотнения в грудных железах у женщин не всегда свидетельствуют о патогенном процессе — в некоторых случаях такие образования можно считать нормальными. Подробнее читайте в статье: «уплотнения в грудных железах у женщин».
Нормы эпителия
После получения биологического материала он отправляется в лабораторию, где выполняется его микроскопическое исследование. Все результаты заносят в специальный бланк, после чего передают ведущему гинекологу для их интерпретации и постановки окончательного диагноза или назначения повторного мазка.
В норме у здоровой женщины должно определяться не меньше 5 и не более 10 эпителиальных клеток, которые находятся в поле зрения. Любые отклонения свидетельствуют о развитии заболевания. В климактерическом периоде не считается патологией показатель, превышающий стандартные значения на 1-2 единицы.
