Антинуклеарные антитела, скрининг (ANA-Screen)/ Антиядерные антитела (ANA

Антитела к ядерным антигенам, ANA

Антитела к ядерным антигенам, ANA (антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор)

— маркер аутоиммунных заболеваний соединительной ткани. Выявление ANA используют в диагностике, оценке активности и контроле лечения патологии соединительной ткани.
Антитела к ядерным антигенам
— это группа аутоантител, которые связываются с нуклеиновыми кислотами и ассоциированными с ними белками в клеточном ядре.

ANA выявляются в крови пациентов с разнообразными аутоиммунными заболеваниями, такими как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный панкреатит и первичный билиарный цирроз, а также с некоторыми злокачественными новообразованиями. Определение АNА важно для оценки мониторинга течения ювенильного хронического артрита в сочетании с ювеитом и вторичного феномена Рейно, ассоциированного с системными ревматическими заболеваниями.

Исследование ANA используется в качестве скрининга аутоиммунных заболеваний у пациента с клиническими признаками аутоиммунного процесса (длительная лихорадка неясного генеза, суставной синдром, кожные высыпания, слабость и др.).

Для пациентов с положительными результатами анализа, рекомендуется проведение подтверждающих тестов, используя более специфичные АNА к отдельным ядерным и цитоплазматическим антигенам (dsDNA, Sm, SS-A/Ro, SS-B/La, Scl-70, РНП). Следует отметить, что отрицательный результат исследования ANA не исключает наличия аутоиммунного заболевания.

Показания:

• для скрининга аутоиммунных заболеваний, таких как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и др.;
• для диагностики системной красной волчанки, оценки ее активности, составления прогноза и контроля за ее лечением;
• для диагностики лекарственной волчанки.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак или спустя 4–6 часов после последнего приема пищи. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов

Референсные значения: индекс позитивности (ИП), менее 1,0 — не обнаружено.

Повышение значений:

• системная красная волчанка;
• лекарственная волчанка;
• смешанное заболевание соединительной ткани;
• синдром Шегрена;
• склеродермия;
• CREST-синдром;
• полимиозит, дерматомиозит;
• ревматоидный артрит.

Антитела к ядерным антигенам (ANA), скрининг

Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они являются маркером аутоиммунных заболеваний и определяются для их диагностики, оценки активности и контроля за их лечением.

Синонимы русские

Антиядерные антитела, антинуклеарные антитела, антинуклеарный фактор, АНФ.

Синонимы английские

Antinuclear Antibody, ANA, Fluorescent Antinuclear Antibody, FANA, Antinuclear factor, ANF.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Антитела к ядерным антигенам (ANA) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. Они выявляются в крови пациентов с разнообразными аутоиммунными заболеваниями, такими как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный панкреатит и первичный билиарный цирроз, а также с некоторыми злокачественными новообразованиями. Исследование ANA используется в качестве скрининга аутоиммунных заболеваний у пациента с клиническими признаками аутоиммунного процесса (длительная лихорадка неясного генеза, суставной синдром, кожные высыпания, слабость и др.). Такие пациенты при положительном результате анализа нуждаются в дальнейшем лабораторном обследовании, включающем более специфичные для каждого аутоиммунного заболевания тесты (например, анти-Scl-70 при подозрении на системную склеродермию, антитела к митохондриям при подозрении на первичный билиарный цирроз). Следует отметить, что отрицательный результат исследования ANA не исключает наличия аутоиммунного заболевания.

ANA наиболее характерны для пациентов с системной красной волчанкой (СКВ). Они обнаруживаются у 98 % больных ею, что позволяет считать это исследование основным тестом для диагностики СКВ. Высокая чувствительность ANA в отношении СКВ означает, что повторные отрицательные результаты делают диагноз «СКВ» сомнительным. При этом отсутствие ANA полностью не исключает заболевания. У небольшой части больных ANA отсутствуют на момент появления симптомов СКВ, но возникают в течение первого года болезни. У 2 % больных антитела к ядерным антигенам не выявляются никогда. При отрицательном результате анализа у пациента с симптомами СКВ целесообразно провести более специфичные для СКВ лабораторные тесты, в первую очередь на антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA). Выявление анти-dsDNA у пациента с клиническими признаками СКВ трактуется в пользу диагноза «СКВ» даже при отсутствии ANA.

СКВ возникает в результате комплекса иммунологических нарушений, развивающихся в течение длительного времени. Степень дисбаланса иммунной системы с течением болезни постепенно нарастает, что находит свое отражение в увеличении спектра аутоантител. Первый этап аутоиммунного процесса характеризуется наличием генетических особенностей иммунного ответа (например, определенных аллелей главного комплекса гистосовместимости, HLA) в отсутствие отклонений лабораторных исследований. На втором этапе в крови удается выявить аутоантитела, при этом клинических признаков СКВ нет. Антитела к ядерным антигенам, а также анти-Ro-, анти-La-, антифосфолипидные антитела наиболее часто выявляются на этом этапе. Обнаружение ANA ассоциировано с 40-кратным увеличением риска СКВ. Период между появлением ANA и развитием клинических симптомов бывает разным и составляет в среднем 3,3 года. Пациенты с положительным результатом анализа на ANA относятся к группе риска по развитию СКВ и нуждаются в периодическом наблюдении у ревматолога и в лабораторном обследовании. Третий этап аутоиммунного процесса характеризуется появлением симптомов болезни, при этом в крови удается обнаружить наиболее широкий спектр аутоантител, включая анти-Sm-антитела, антитела к двухцепочечной ДНК и рибонуклеопротеину. Таким образом, для получения полной информации о степени иммунологических нарушений при СКВ тест на ANA необходимо дополнять анализом на другие аутоантитела.

Течение СКВ варьируется от стойкой ремиссии до фульминантного люпус-нефрита. Чтобы дать прогноз заболевания, оценить его активность и эффективность лечения, используют различные клинические и лабораторные критерии. Так как ни один из тестов не позволяет однозначно предсказать обострение или поражение внутренних органов, мониторинг СКВ – это всегда комплексная оценка, включающая исследование ANA, а также других аутоантител и некоторых общеклинических показателей. На практике врач самостоятельно определяет набор тестов, наиболее точно отражающих, как изменяется течение заболевания у каждого пациента.

Особый клинический синдром представляет лекарственная волчанка. Она развивается на фоне приема некоторых лекарственных препаратов (чаще всего прокаинамида, гидралазина, некоторых ингибиторов АПФ и бета-блокаторов, изониазида, миноциклина, сульфасалазина, гидрохлортиазида и др.) и характеризуется симптомами, напоминающими СКВ. В крови большинства пациентов с лекарственной волчанкой также удается выявить ANA. При симптомах аутоиммунного процесса у пациента, принимающего эти препараты, рекомендуется анализ на ANA, чтобы исключить лекарственную волчанку. Особенность лекарственной волчанки заключается в исчезновении иммунологических нарушений и симптомов болезни после полной отмены препарата – в это время рекомендуется контрольное исследование ANA, и отрицательный результат подтверждает диагноз «лекарственная волчанка».

ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (в группе пациентов старше 65 лет эта цифра может достигать 10-37 %). Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных.

Для чего используется исследование?

• Для скрининга аутоиммунных заболеваний, таких как системные заболевания соединительной ткани, аутоиммунный гепатит, первичный билиарный цирроз и др.
• Для диагностики системной красной волчанки, оценки ее активности, составления прогноза и контроля за ее лечением.
• Для диагностики лекарственной волчанки.

Когда назначается исследование?

• При симптомах аутоиммунного процесса: длительной лихорадке неясного генеза, болях в суставах, кожной сыпи, немотивированной утомляемости и др.
• При симптомах системной красной волчанки (лихорадка, поражения кожи), артралгий/артрита, пневмонита, перикардита, эпилепсии, поражения почек.
• Каждые 6 месяцев или чаще при обследовании пациента с диагнозом «СКВ».
• При назначении прокаинамида, дизопирамида, пропафенона, гидралазина и других лекарственных препаратов, ассоциированных с развитием лекарственной волчанки.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата:

• системная красная волчанка;
• аутоиммунный панкреатит;
• аутоиммунные заболевания щитовидной железы;
• злокачественные новообразования печени и легких;
• полимиозит/дерматомиозит;
• аутоиммунный гепатит;
• смешанное заболевание соединительной ткани;
• миастения;
• диффузный интерстициальный фиброз;
• синдром Рейно;
• ревматоидный артрит;
• системная склеродермия;
• синдром Шегрена;
• прием таких лекарств, как прокаинамид, дизопирамид, пропафенон, некоторые ингибиторы АПФ, бета-блокаторы, гидралазин, пропилтиоурацил, хлорпромазин, литий, карбамазепин, фенитоин, изониазид, миноциклин, гидрохлортиазид, ловастатин, симвастатин.

Причины отрицательного результата:

• норма;
• неправильное взятие биоматериала на исследование.

Что может влиять на результат?

• Уремия может приводить к ложноотрицательному результату.
• Многие лекарственные препараты ассоциированы с развитием лекарственной волчанки и появлением ANA в крови.

Важные замечания

• Отрицательный результат у пациента с признаками аутоиммунного процесса не исключает наличия аутоиммунного заболевания.
• ANA выявляются у 3-5 % здоровых людей (10-37 % в возрасте старше 65 лет).
• Положительный результат у пациента без симптомов аутоиммунного процесса необходимо интерпретировать с учетом дополнительных анамнестических, клинических и лабораторных данных (риск СКВ у таких пациентов увеличен в 40 раз).

Также рекомендуется

• Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
• Лейкоцитарная формула
• Общий анализ мочи с микроскопией осадка
• Креатинин в сыворотке
• Альбумин в сыворотке
• С3 компонент комплемента
• Аланинаминотрансфераза (АЛТ)
• Аспартатаминотрансфераза (АСТ)
• Билирубин общий
• Скрининг болезней соединительной ткани
• Антитела к экстрагируемому ядерному антигену (ENA-скрин)
• Антинуклеарные антитела (анти-Sm, RNP, SS-A, SS-B, Scl-70, PM-Scl, PCNA, CENT-B, Jo-1, гистонов, нуклеосом, Ribo P, AMA-M2), иммуноблот
• Антитела к двухцепочечной ДНК (анти-dsDNA), скрининг
• Диагностика системной красной волчанки
• Антифосфолипидные антитела IgG
• Антифосфолипидные антитела IgM
• Диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС)

Кто назначает исследование?

Ревматолог, дерматовенеролог, нефролог, педиатр, врач общей практики.

Литература

• Arbuckle MR, McClain MT, Rubertone MV, Scofield RH, Dennis GJ, James JA, Harley JB. Development of autoantibodies before the clinical onset of systemic lupus erythematosus. N Engl J Med. 2003 Oct 16;349(16):1526-33.
• Bizzaro N, Tozzoli R, Shoenfeld Y. Are we at a stage to predict autoimmune rheumatic diseases? Arthritis Rheum. 2007 Jun;56(6):1736-44.
• Guidelines for referral and management of systemic lupus erythematosus in adults. American College of Rheumatology Ad Hoc Committee on Systemic Lupus Erythematosus Guidelines. Arthritis Rheum. 1999 Sep;42(9):1785-96.
• Fauci et al. Harrison’s Principles of Internal Medicine/A. Fauci, D. Kasper, D. Longo, E. Braunwald, S. Hauser, J. L. Jameson, J. Loscalzo; 17 ed. – The McGraw-Hill Companies, 2008.

Антинуклеарные антитела, скрининг (ANA-Screen)

Тест ANA-Screen ELISA (IgG) предназначен для полуколичественного определения in vitro IgG-аутоиммунных антител человека к десяти различным антигенам: dsDNA, гистонам, рибосомальным Р-белкам, nRNP, Sm, SS-A, SS-B, Scl-70, Jo-1 и центромерам в сыворотке и плазме крови.

Один из распространенных скрининзовых тестов, используемых в диагности­ке системных поражений соединительной ткани.

Это качественное определение аутоантител класса IgG к экстрагируемым ядер­ным антигенам (гетерогенной группе белков и нуклеиновых кислот клеточного яд­ра). Обнаружение этих антител с большой вероятностью говорит об активной крас­ной волчанке (чувствительность 98%), они могут наблюдаться и при других систем­ных ревматических заболеваниях.

Определение антител к нуклеарным атигенам имеет большое значение для диагностики коллагенозов. При узелковом периартериите титр может увеличиваться до 1:100, при дерматомиозите – 1:500, при системной красной волчанке – 1:1000 и выше. При СКВ тест на выявление антинуклеарного фактора обладает высокой степенью чувствительности (89%), но умеренной специфичностью (78%) по сравнению с тестом на определение антител к нативной ДНК (чувствительность 38%), специфичность 98%). Корреляции между высотой титра и клиническим состоянием больного нет, однако выявление антител к нуклеарным антигенам служит диагностическим критерием и имеет важное патогенетическое значение. Антитела к нуклеарным антигенам высокоспецифичны для системной красной волчанки. Сохранение высокого уровня антител в течение длительного времени является неблагоприятным признаком. Снижение уровня предвещает ремиссию или (иногда) летальный исход.

При склеродермии частота выявления антител к нуклеарным антигенам составляет 60-80%, однако титр их ниже, чем СКВ. Между уровнем антинуклеарного фактора в крови и степенью тяжести заболевания не существует взаимосвязи. При ревматоидном артрите часто выделяют СКВ-подобные формы течения, поэтому довольно часто выявляются атитела к нуклеарным атигенам. При дерматомиозите атитела к ядерным атигенам в крови встречаются в 20-60% случаев (титр 1:500), при узелковом периартериите — в 17% (1:100), при болезни Шегрена — в 56% в сочетании с артритом и в 88% случаев – при комбинации с синдромом Гужеро-Шегрена. При дискоидной красной волчанке антинуклеарный фактор выявляется у 50% больных.

Кроме ревматических заболеваний, антитела к ядерным антигенам в крови обнаруживаются при хроническом активном гепатите (30-50% наблюдений).

Аутоантитела к нуклеарным антигенам могут выявляться в крови при инфекционном мононуклеозе, острых и хронических лейкозах, приобретенной гемолитической анемии, болезни Вальденстрема, циррозе печени, биллиарном циррозе печени, гепатитах, малярии, лепре, хронической почечной недостаточности, тромбоцитопениях, лимфопролиферативных заболеваниях, миастении и тимомах.

Почти в 10% случаев антинуклеарный фактор обнаруживается у здоровых людей, однако титр у них не превышает 1:50.

Aнтинуклеарныe антителa класса IgG (S-ANA IgG)

Противоядерные IgG антитела

(антинуклеарные антитела) – это аутоантитела, направленные против собственных антигенов ядра и цитоплазмы клеток. Определение ANA в сыворотке крови является важным скрининговым методом для диагностики системных заболеваний соединительной ткани, аутоиммунных гепатитов, а также нескольких органоспецифических аутоиммунных заболеваний. Обнаружение аутоантител имеет важное диагностическое и прогностическое значение, они позволят врачу оценить как активность заболевания, так и эффективность его лечения. Отрицательный результат указывает на отсутствие аутоиммунного заболевания, в том числе системного заболевания соединительной ткани.

Показания:

Распространенность антинуклеурных антител в случае различных аутоиммунных заболеваний следующая:

• системная красная волчанка 95-100%
• лекарственная волчанка 100%
• смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ, синдром Шарпа) 100%
• ревматоидный артрит 20-40%
• прогрессивный системный склероз 85-95%
• полимиозит и дерматомиозит 30-50%
• синдром Шегрена 70-80%
• аутоиммунный гепатит 30-40%
• язвенный колит 26%
• ограниченная кожной формой системная склеродермия – CREST-синдром 55%
• первичный билиарный цирроз (ПБЦ) 95-100%

Метод анализа:

реакция непрямой иммунофлюоресценции (нРИФ)

Референсное значение:

титр <1:100 отрицательный

Интерпретация:

Определение ANA при помощи нРИФ с использованием в качестве субстрата клеточной линии HEp-2 и ткани печени крысы/обезьяны и др. слайдов позволяет определить около 40-100 различных аутоантител, которые при визуальной оценке под микроскопом дают различные типы свечения. В случае положительного результата следует учитывать, что и у здоровых людеймогут присутствовать ANA, но аутоиммунное заболевание развиваеться не всегда., В то же время обнаруженные аутоантитела могут предшествовать клиническому проявлению заболевания за 10-20 лет (например, СКВ, ПБЦ).

Среди здорового населения ANA-позитивными являются примерно 5% молодых взрослых (из них 5-10% беременных женщин), и присутствие ANA увеличивается с возрастом – в возрасте старше 65 лет тест на ANA дает положительный результат в примерно 20-30% случаев. Антинуклеарные антитела возможно определить и в острой фазе различных инфекционных заболеваний, в течение онкологических заболеваний и т.д.

Если в ходе скрининга методом нРИФ обнаружены ANA IgG, необходимо более точное определение антигенов для дифференциальной диагностики заболевания соединительной ткани при помощи дополнительных исследований : определение антител SS-A, SS-B, Scl-70, U1-nRNP, Sm, Jo-1, Centr из ENA панели , или типизирование антинуклеарных антител с помощью панели S-ANA Typ (nRNP/Sm, Sm, SS-A, Ro-52, SS-B, Scl-70, Jo-1, PM-Scl, CENP, dsDNA, нуклеосомы, гистоны, рибосомальный p-протеин, AMA-M2) методом иммуноблота. В случае гомогенного свечения следует определить dsDNA IgG (специфический маркер при СКВ).

При наиболее распространенных системных заболеваниях соединительной ткани положительный результат дают тесты на определение антител к следующим антигенам и соответствующие им типа свечения методом нРИФ