ПЦР: что это такое? Диагностика инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции

Полимеразная цепная реакция (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) – искусственный процесс, в ходе которого многократно копируются определенные участки ДНК (РНК). Метод изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.

Области применения ПЦР чрезвычайно широки. Особое место ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.

Диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. «Иглой» является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).

Открытие этого метода – выдающееся событие в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике подняться на качественно новый уровень.

Почему важна своевременная сдача анализа на скрытые инфекции?

Незащищенные половые контакты с непроверенным партнером могут стать причиной передачи возбудителя скрытого заболевания – инфекционного, вирусного, грибкового. Опасность заражения состоит в том, что болезнь долгое время способна находиться в латентной форме, не проявляя своих симптомов. Из-за бессимптомного течения инфекция обычно бывает обнаружена случайно, причем довольно часто – уже в хронической форме. Помимо локализации в органах репродуктивной системы, возбудитель может распространяться к другим органам, вызывая воспаление мочевого пузыря, почек и т.д. Некоторые скрытые инфекции опасны возможным развитием доброкачественных и злокачественных новообразований.

Чтобы избежать неблагоприятного прогноза и вовремя обнаружить возможное заболевание, рекомендуется регулярно сдавать анализ на скрытые половые инфекции. Если женщина имела незащищенный секс с мужчиной, в здоровье которого она не уверена, желательно пройти обследование как можно раньше. Время проведения анализов на скрытые половые инфекции зависит от заболевания: например, чтобы выявить возбудителя сифилиса (Syphilis), рекомендуют проходить диагностику на 21 день после предполагаемого заражения, на трихомониаз – через 2-21 день, а на хламидиоз – через 10 дней.

При наличии постоянного партнера и использовании барьерных методов контрацепции частота обследования меньше – мазок и анализ крови на скрытые инфекции рекомендуется сдавать в профилактических целях примерно раз в год или при планировании беременности.

Основы ПЦР

Основа метода — многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуального обнаружения. При этом многократно копируется только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.

Кроме того, исследование позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификации личности и др.

Анализ на скрытые инфекции у женщин: какие заболевания можно обнаружить с его помощью?

Ниже вы найдете перечень заболеваний, которые показывает и позволяет обнаружить анализ на скрытые инфекции. Однако нужно учитывать, что каждая лаборатория предлагает свой собственный пакет услуг, отличающийся по стоимости и набору исследований, поэтому входящие в него методы диагностики могут варьироваться. Например, помимо основных инфекций, список которых приведен ниже, некоторые лаборатории предлагают также анализы на вирус гепатита В (Hepatitis B) и С (Hepatitis С), ВИЧ (вирус иммунодефицита человека), сифилис (Syphilis).

Генитальный герпес

Вирус герпеса может присутствовать в организме человека годы, не проявляя себя. Если же симптомы генитального герпеса все-таки проявляются, то на слизистой влагалища, на поверхности половых губ, промежности и вокруг заднего прохода образуются мелкие пузырьки, заполненные мутноватой жидкостью. Их появлению предшествуют зуд и жжение, а иногда озноб и недомогание.

ВПЧ (вирус папилломы человека)

Особенность ВПЧ (HPV — Human Papillomavirus) заключается в том, что некоторые из его видов отличаются высокой онкогенностью и могут стать причиной развития рака шейки матки, в то время как остальные являются относительно безопасными. Поэтому при подозрении на носительство ВПЧ необходимо пройти обследование для дифференцирования типа возбудителя. Инфекция проявляется в виде образования на шейке матки, стенках влагалища, малых половых губах и вокруг заднего прохода бородавок – остроконечных кондилом.

ЦМВ (цитомегаловирус)

Это одна из разновидностей вируса герпеса. ЦМВ (Cytomegalovirus) имеет много «масок» течения. Опасность острого заражения данной инфекцией возрастает в том случае, если женщина находится на ранних сроках беременности, так как ЦМВ пагубно влияет на развивающийся плод и может вызвать у него патологии развития нервной системы – спинного или головного мозга.

Кандидоз

В большинстве случаев кандидоз (молочница) проявляется появлением на стенках влагалища белого творожистого налета, сопровождающегося зудом и жжением. Однако иногда эта болезнь может присутствовать в организме в латентной форме – в таком случае речь идет о кандидоносительстве.

Хламидиоз

Самое распространенное ЗППП. Бессимптомное протекание хламидиоза делает его трудно диагностируемым. Поэтому для того, чтобы узнать, есть у вас это заболевание, необходимо сдать анализ на скрытые инфекции. При симптомном протекании хламидиоза появляются слизистые или слизисто-гнойные выделения с неприятными запахом, вагинальное жжение и боль при мочеиспускании.

Гарднереллез

Присутствие гарднереллы в незначительных количествах во влагалище здоровой женщины абсолютно нормально. Однако если вследствие нарушения баланса микрофлоры этот микроорганизм начинает активно размножаться, развивается гарднереллез. Болезнь может быть как бессимптомной, так и проявляться в виде вагинального зуда и жжения, увеличения объёма выделений с запахом «гнилой рыбы».

Микоплазмоз

Данное заболевание вызывают микоплазмы – микроскопические организмы, занимающие промежуточное место между вирусами и бактериями. Характеризуется скрытой симптоматикой; в редких случаях возможно появление прозрачных или желтовато-белых вагинальных выделений, болезненности при мочеиспускании и дискомфорта после полового акта.

Уреаплазмоз

Причина болезни­ – микроскопические бактерии уреаплазмы, заселяющие слизистую влагалища. Протекает бессимптомно или же в виде необычных вагинальных выделений, отличающихся от нормальных консистенцией или количеством. Вызывает восходящие заболевания мочевыделительной системы: уретрит, цистит, пиелонефрит; половой системы: сальпингоофорит, эндометрит.

Гонорея

Гонорею (Gonorrhoea) вызывают гонококки Neisseriagonorrhoeae– грамотрицательные микроорганизмы, передающиеся половым путем от инфицированного человека. Вероятность заражения женщины во время незащищенного секса с носителем инфекции достаточно велика и составляет около 50%. В единичных случаях встречается бытовой путь заражения. Однако это редкость, так как гонококки неустойчивы по отношению к условиям окружающей среды и быстро погибают вне организма человека. Также возможен вертикальный путь заражения – инфекция распространяется во время беременности, от матери к плоду. В таком случае у ребенка наблюдается гонококковый конъюнктивит. Инфекция проявляется отечностью век, покраснением конъюнктивы и желтовато-белыми гнойными выделениями из глаз.

Мнение эксперта

У женщин часто встречается бессимптомное течение заболевания. Если же симптомы все-таки имеются, то они представлены желтовато-белыми или зеленоватыми гнойными выделениями из вагины, зудом и жжением, межменструальными кровянистыми выделениями, учащенными позывами к мочеиспусканию, болезненностью во время опорожнения мочевого пузыря. В особо тяжелых случаях возможно повышение температуры тела, озноб и общее недомогание. Среди возможных осложнений гонореи у женщин — воспаление яичников, матки и маточных труб, пельвиоперитонит.

Врач акушер-гинеколог высшей категории Оксана Анатольевна Гартлеб

Анализы на скрытые инфекции у женщин: список методов исследования

Какие анализы нужно сдать на скрытые инфекции, как их и откуда берут? Ниже вы найдете перечень основных лабораторных исследований, использующихся для выявления возбудителя болезни. Цена на них зависит от места проведения: в частных лабораториях она обычно выше, чем в государственных.

  • Исследование урогенитального мазка на микрофлору. Для его проведения врач производит забор небольшого количества биоматериала со слизистых оболочек при помощи одноразового шпателя, после чего наносит полученные образцы на предметное стекло. Суть данного метода исследования сводится к воздействию на биоматериал особыми веществами, окрашивающими разные микроорганизмы в определенные цвета. Проведение данного исследования позволяет выявить ряд патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также оценить общий состав микрофлоры влагалища, уретры и шейки матки.
  • ПЦР (полимеразная цепная реакция). Этот метод исследования на инфекции, считающийся «золотым стандартом» в современной диагностике, обладает высокой точностью. Для его проведения врач при помощи одноразового гинекологического шпателя берет мазок секрета из влагалища, уретры и шейки матки. Забор биоматериала безболезненный и не должен причинять пациентке дискомфорт. Мазок помещают в специальный прибор (реактор) и постепенно увеличивают концентрацию нуклеиновой кислоты. Анализ включает в себя три цикла (денатурацию, отжиг и элонгацию). В ходе исследования лабораторный сотрудник работает с молекулами ДНК или РНК возбудителя, обнаруженными в биоматериале. ПЦР помогает определить наличие у женщины хламидиоза, кандидоза, гарднереллеза, микоплазмоза (Mycoplasmosis), трихомониаза (Trichmonosis, trichomoniasis), вируса папилломы человека, вируса герпеса, цитомегаловирус.
  • Бакпосев (бактериальный посев). Данный метод подразумевает выращивание микроорганизмов, полученных в результате забора биоматериала, в подходящей для них питательной среде. Он дает возможность выявить присутствие в биоматериале инфекционных микроорганизмов и определить их количество, а также установить чувствительность инфекции к антибиотикам. При помощи гинекологического шпателя или щеточки врач берет мазок из цервикального канала, уретры и влагалища пациентки. Полученный биоматериал помещают на стерильное стекло, после чего переносят его в подходящую биологическую среду. Сколько делается анализ? В зависимости от вида микроорганизма на его культивирование может потребоваться разное время – от 3 дней до 3 недель. По истечении необходимого периода производится оценка характера образовавшихся колоний микроорганизмов и на основании этих результатов ставится диагноз. Проведение бакпосева рекомендовано при наличии любых воспалительных заболеваний органов малого таза невыясненной этиологии, при подозрении на присутствие инфекций, вызывающих кандидоз, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз, а также при обнаружении в урогенитальном мазке большого количества лейкоцитов.
  • ИФА (так называется иммуноферментный анализ). В качестве материала для исследования используют мазок, взятый из цервикального канала, или венозную кровь. Благодаря проведению ИФА можно выявить присутствие не самих патогенных агентов, а антител к ним – иммуноглобулинов G и М. Метод обладает достаточно высокой точностью. Он позволяет оценить остроту процесса, а по индексу авидности – давность заболевания.
  • РИФ (реакция иммунофлюоресценции). В ходе проведения исследования биоматериал (мазок слизи цервикального канала и влагалища) обрабатывают особыми флуоресцентными веществами, после чего оценивают полученный результат с помощью люминесцентного микроскопа.

Мнение эксперта

Выбор оптимального метода исследования всегда должен оставаться за врачом. Неподготовленная пациентка не в состоянии самостоятельно выбрать тип анализа, обратившись непосредственно в лабораторию.

Врач акушер-гинеколог высшей категории Оксана Анатольевна Гартлеб

ПЦР-диагностика гепатитов

Известно как минимум 5 вирусов, которые способны вызывать поражение печени — возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса. Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться.

Быстро и точно определить возбудителя – первоочередная задача врача. Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно. Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции – важный шаг в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

  • Вирус гепатита А, качественное определение
  • Вирус гепатита В, количественное определение ДНК
  • Вирус гепатита В, качественное определение генотипа
  • Вирус гепатита С, качественное определение РНК
  • Вирус гепатита С, количественное определение РНК
  • Вирус гепатита D, качественное определение РНК

Анализ на скрытые инфекции у беременных

Присутствие в организме скрытых инфекций способно негативно повлиять на возможность женщины забеременеть и благополучно родить ребенка. Наличие в яичниках воспалительного процесса, вызванного болезнетворным агентом, пагубно влияет на формирование фолликулов и осуществление овуляции, за счет чего становится возможным ановуляторное бесплодие. В случае присутствия некоторых скрытых инфекций зачатие осуществляется, но может наступить гибель эмбриона на ранних сроках. Еще одна опасность заключается в том, что скрытые инфекции могут стать причиной врожденных пороков развития и аномалий органов и систем малыша.

Также опасность состоит в том, что ребенок может заразиться некоторыми инфекциями во время прохождения по родовым путям. Например, возможно инфицирование вирусом герпеса или кандидозом. Поэтому если к моменту родов у женщины был диагностирован генитальный герпес в активной фазе, рекомендовано проведение кесарева сечения.

Поэтому сдать анализы на скрытые инфекции рекомендуется всем парам (не только женщинам, но и их партнерам), планирующим родить ребенка. Конечно, разумнее сделать это еще на этапе планирования. перед беременностью. В обязательном порядке исследование на скрытые инфекции проводится на ранних сроках беременности при постановке на диспансерный учет.

Какие же анализы на скрытые инфекции сдаются при беременности? Обычно помимо указанных выше исследований на инфекции, передающиеся половым путем, в пакет анализов для беременных входят также диагностика гепатита, цитомегаловируса, вируса простого герпеса, токсоплазмоза и краснухи. Эти заболевания входят в панель TORCH-исследований, проведение которых рекомендовано при постановке на учет в женскую консультацию. Контрольное обследование на гепатиты В и С, ВИЧ, сифилис повторяются в третьем триместре.

Как подготовиться к анализам на скрытые инфекции?

Для получения достоверных результатов исследования важна правильная подготовка к анализам на скрытые инфекции. Она включает в себя следующее:

  • Отказ от приема антибиотиков за 10-14 дней до проведения исследования.
  • Воздержание от интимной близости в течение 2 суток перед сдачей анализа.
  • Использование для подмывания чистой воды без добавления интимных гелей или мыла за сутки до забора биоматериала.
  • Отказ от влагалищных спринцеваний, установки вагинальных суппозиториев и использования гелей за 1-2 дня до обследования.
  • Для получения максимально точных результатов анализ рекомендуется сдавать на 5-6 день менструального цикла, но не в первые дни месячных.

Обычно забор биоматериала для анализа на скрытые инфекции проходит безболезненно. Однако в некоторых случаях женщина может ощущать легкий дискомфорт, вызванный контактом медицинского шпателя со слизистой влагалища и шейки матки. Чтобы уменьшить неприятные ощущения, после проведения обследования можно воспользоваться восстанавливающим гелем «Гинокомфорт». Это средство имеет всю необходимую документацию и сертификаты качества. Оно не только позволяет справиться с возможным дискомфортом, зудом и жжением, но также обеспечивает быстрое восстановление и защиту слизистой, восстанавливает и поддерживает уровень pH на физиологическом уровне, оказывает противовоспалительное, противомикробное и антисептическое действие. Согласно клиническим исследованиям, проведенным на кафедре дерматологии с клиникой СПбГМУ под руководством Игнатовского А.В. и Соколовского Е.В., гель хорошо переносится и обеспечивает отличные результаты за счет входящего в его состав масла чайного дерева.

Источники:

  1. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИЙ, ПЕРЕДАЮЩИХСЯ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ. Боровкова Л. В., Челнокова Е. В. // Медицинский альманах. – 2010. – № 2 (11). – С. 150-156.
  2. ИНФЕКЦИИ, ПЕРЕДАЮЩИЕСЯ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ: ОСОБЕННОСТИ ЭПИДЕМИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА, КЛИНИКИ И ДИАГНОСТИКИ. Батыршина С. В., Батыршин Р.Ф. // Практическая медицина. – 2011. – № 1 (49). – С. 12-16.
  3. Инфекции, передаваемые половым путем. Соколовский E.В., Савичева А.М., Домейка М., Айламазян Э.К., Беляева Т.В. // Руководство для врачей. М.:МЕДпресс-информ. — 2006. — С. 20-243.
  4. Урогенитальные инфекции во время беременности (диагностика, профилактика, лечение). Сидорова И.С., Макаров И.О., Матвиенко Н.А., Боровкова Е.И., Овешникова Т.З., Леонова И.П. // М.: ООО Издательское товарищество «АдамантЪ». 006. — С. 3-15.
  5. Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. Кулаков В.И., Прилепская В.Н., Радзинский В.Е. // М.: ГЭОТАР-Медиа. — 2007. — С. 134-156.
  6. https://express-med-service.ru/ginekologiya/obsledovanie-na-ippp/
  7. https://www.researchgate.net/publication/47509879_Latent_Class_Analysis_Is_Useful_to_Classify_Pregna…
  8. https://bmcpregnancychildbirth.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12884-017-1300-1
  9. https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0193589
  10. https://www.bmj.com/content/321/7254/142

Как проводится диагностика

Для диагностического теста на COVID-19 медицинский работник берет образец слизи из носа, горла или образец слюны. Образец, необходимый для диагностического тестирования, можно взять в кабинете врача, в медицинском учреждении, в центре тестирования или на дому (а некоторых ситуациях выезд лаборанта возможен на дом). Рекомендуется использовать длинный мазок из носа (мазок из носоглотки), хотя мазок из зева приемлем. Врач или другой медицинский работник вставляет в нос пациента тонкую гибкую палочку с ватой на кончике или проводит тампоном по задней стенке горла, чтобы собрать образец слизи. Это может быть несколько неприятно. Что касается пробы из носа, мазок может производиться в обеих ноздрях, чтобы собрать достаточно слизи для анализа. Тампон ненадолго остается на месте, прежде чем его осторожно поворачивают при извлечении. Образец герметично закрывается в пробирке и отправляется в лабораторию для анализа.

Популярные вопросы

Здравствуйте. Я сдавала анализы на инфекции. Обнаружены: хламидия трахоматис, биовар u.urealyticum T960, биовар ureaplasma parvum, гарднерелла вагиналис, ВПЧ 16 генотип. За первый прием заплатила 3500 рублей. Чтобы назначили лечение надо заново заплатить за прием около 2000. возможности нет заново пойти на прием. Посоветуйте пожалуйста какое-нибудь лечение.
Вам необходимо повторно обратиться на прием к врачу для назначения лечения, потому что при составлении схемы и этапов терапии принимаются во внимание не только результаты анализов, но и данные осмотра с оценкой жалоб, распространенности и длительности заболевания.

Скажите пожалуйста по всем инфекциям написано: не выявлено, а уреаплазма: 10*2.7 Норма ли это?

Уреаплазмы относятся к инфекциям передающимся половым путем. Микробное число может меняться при снижении иммунитета, а так же инфицировать партнёра. Выявленная инфекция требует проведения лечения.

Здравствуйте, какова вероятность достоверной информации анализа ХГЧ (выявление беременности на ранней стадии), если за день до сдачи анализов выпила таблетку гинепристон?Могут ли при осмотре на узи спутать желтую кисту и беременность? Здравствуйте! Анализ определение уровня ХГЧ является самым достоверным в плане диагностики ранних сроков беременности. Прием препарата не повлияет на показатель, так как экстренная контрацепция применяется с целью не допустить прикрепления оплодотворенной яйцеклетки и не позднее 72 часов после незащищенного полового контакта. Киста желтого тела формируется в яичнике после овуляции и обеспечивает выработку необходимого количества прогестерона во 2 фазу менструального цикла. Перепутать по УЗИ- признакам её с возможной внематочной яичниковой беременностью нельзя.

Здравствуйте. Мой диагноз: хронический активный ВПЧ ассоциированный цервицит. Подострый вагинит. ВПЧ 6,53 тип. ВПГ 2 типа. Дисплазия шейки матки неуточненная. Пока готовлюсь к лечению,принимаю: Юнидокс, Орнидозол, Максилак, флюконазол, вагиферог свечи и виферон. Начало приема препаратов 14 число-конец 23. Поскольку препараты являются антибиотиками, вопрос: можно ли в последний день приёма (23) выпить на мероприятии слабый алкоголь? Не будет ли это фатально? Или 23 числа может не принимать таблетки,а на следующий?

Здравствуйте! Вам следует завершить курс без перерыва. Прием слабого алкогольного напитка в очень малом количестве не сыграет большой роли перед планируемым дальнейшим лечением.
Для точной диагностики обращайтесь к специалисту

Что входит в комплекс

  • Вирус герпеса 1 типа, ДНК (HHV-1, ПЦР) соскоб, кол.
  • Вирус герпеса 2 типа, ДНК (HHV-2, ПЦР) соскоб, кол.
  • Хламидия, ДНК (Chlamydia trachomatis, ПЦР) соскоб, кол.
  • Уреаплазмы, ДНК (Ureaplasma species, ПЦР) соскоб, кол.
  • Микоплазма, ДНК (Mycoplasma genitalium, ПЦР) соскоб, кол.
  • Микоплазма, ДНК (Mycoplasma hominis, ПЦР) соскоб, кол.
  • Гарднерелла, ДНК (Gardnerella vaginalis, ПЦР) соскоб, кол.
  • Трихомонада, ДНК (Trichomonas vaginalis, ПЦР) соскоб, кол.
  • Гонорея, ДНК возбудителя (Neisseria gonorrhoeae, ПЦР) соскоб, кол.
  • Кандида, ДНК (Candida albicans, ПЦР) соскоб, кол.
  • Цитомегаловирус, ДНК (Сytomegalovirus, ПЦР) соскоб, кол.
  • ВПЧ 16 типа, ДНК (HPV, ПЦР) соскоб, кол.
  • Лактобактерии, ДНК (Lactobаcillus spp., ПЦР) соскоб, кол.
  • ВПЧ 18 типа, ДНК (HPV, ПЦР) соскоб, кол.
Рейтинг
( 1 оценка, среднее 5 из 5 )
Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Для любых предложений по сайту: [email protected]