Выявление гена RHD плода в крови матери. Резус‑фактор плода

Резус-конфликт

резус-конфликт, резус-фактор, беременность

При посещении врача для подтверждения беременности женщина сдает ряд анализов, среди которых обязательным является определение резус-фактора. Поводов для беспокойства не будет, если он положительный, а также в случае отрицательного резуса крови у обоих будущих родителей.

История открытия резус-фактора В 1940 году доктора Карл Ландштейнер и Александр Винер опубликовали сведения о резус-антигене, также называемом резус-фактором. Ученые сумели получить сыворотку крови, которая взаимодействовала с примерно 85% различных эритроцитов человека. Вещество было получено в результате иммунизации кроликов с эритроцитами макаки-резуса (Macacus rhesus) и названо резус-фактором.

Проблема несовместимости

Резус-фактор проверяется путем теста на кровь. «Rh−» несет угрозу для роженицы в случае, если ее Rh не совпадает с Rh ребенка. Исследования показали, что некоторые проблемы связаны с несовместимостью типов крови между матерью и плодом или между родителями. Как написано выше, маркеры (антигены) защищают организм от внешних вредителей, таких как бактерии и вирусы. Когда антиген встречает чужеродный предмет, он создает антитела против него. То же самое может произойти при попытке забеременеть. Организм отреагирует выработкой антител на появление сперматозоидов или плода, что будет препятствовать зачатию.

Многие лекарственные препараты от мигрени помогают справиться с симптомами, но не вылечить патологию. Триптаны – группа медикаментов, которая предназначена именно для терапии болезни. Подробнее читайте в статье: «препараты триптаны от мигрени».

Проблема появляется, когда Rh материнской крови не совпадает с Rh плода, и организм начинает вырабатывать антитела против белков на эритроциты ребенка. Rh-отрицательная роженица не всегда несет угрозу развитию плода:

• если оба родителя Rh-отрицательные, и ребенок также получает «Rh−», то осложнений не возникает;
• если у матери «Rh−», а у отца «Rh+», а плод получает отрицательный резус, то угрозы конфликта нет;
• если роженица имеет «Rh+», а у ребенка отрицательный резус — несовместимости белков не произойдет.

Шанс наследования ребенком Rh и вероятность конфликта в таблице.

Резус-фактор

Контроль состава крови

Если в паре только женщина является носителем отрицательного резус-фактора, ей важно регулярно сдавать анализ крови на резус-антитела. До 32-й недели беременности это необходимо делать ежемесячно, с 32-й по 35-ю – один раз в 2 недели. А с 35-й до 40-й недели – еженедельно. Такой мониторинг будет демонстрировать, как меняется состав крови будущей мамы. И если количество антител в ней начнет увеличиваться, необходимо принимать экстренные меры для спасения жизни будущего ребенка.

Кроме резус-фактора возможно развитие иного конфликта, если кровь будущей матери и ребенка будут несовместимы по группе. Групповая несовместимость развивается, если мама имеет первую группу крови – 0 (I), а ребенок – вторую А (II) или третью В (III).

Какие последствия грозят матери и ребенку

Беременной женщине развитие серологического конфликта ничем не угрожает и никак не отражается на ее здоровье, чего не скажешь о ребенке. Серологический конфликт может вызвать тяжелое гемолитическое заболевание (эритробластоз плода), повреждение головного мозга, гипоксию, повредить ЦНС, печень и почки. По этой причине, такая беременность требует тщательного медицинского контроля.

Влияет ли совместимость групп крови на зачатие и пол ребенка?

При планировании ребенка родителям необходимо знать собственную группу крови и резус-фактор. Это важная информация, которая может повлиять как на течение беременности, так и на здоровье будущего ребенка.

Так ли важна совместимость по группе крови и резус фактору? Сама по себе группа крови (если не брать во внимание резус-фактор) на процесс зачатия, течение беременности или пол ребенка никаким образом не влияет. В практики любого репродуктолога есть не один случай, когда родители с разной группой крови становились родителями здорового ребенка.

В идеале резус-фактор обоих родителей должен совпадать, в противном случае существует высокий риск развития серологического конфликта, когда материнский организм отторгает плод как чужеродное тело.

Риск резус-конфликта для будущего ребенка

Появление антител в крови беременной – сигнал о том, что в нее попали положительно заряженные клетки крови плода. Таким образом материнский организм начинает избавляться от «инородного тела» – собственного ребенка. Резус-антитела разрушают красные кровяные тельца крохи. Защищаясь и восполняя их, печень и селезенка малыша начинают усиленно вырабатывать эритроциты и в результате активной работы вырастают в размерах. В крови будущего малыша увеличивается количество билирубина в крови, провоцирующее кислородное голодание. После выявления в крови будущей матери антител к резус-фактору врачи должны контролировать развитие плода методом УЗИ и особое внимание уделять размерам его печени и селезенки.

Система AB0

Данную систему для типологии групп крови начали использовать с 1900 года, когда было открыто наличие в крови (на эритроцитах) антигенов, которые назвали агглютиногенами, а также антител к ним, которые начали называть агглютининами. Агглютиногены бывают А и В, а агглютинины обозначают, как альфа и бета. Возможные комбинации таких белков создают 4 группы:

• 0 (первая) – содержит альфа агглютинин и бета агглютинин.
• А (вторая) – содержит бета агглютинин и А агглютиноген.
• В (третья) — содержит альфа агглютинин и В агглютиноген.
• АВ (четвертая) – содержит А агглютиноген и В агглютиноген.

• Какая группа крови подходит всем: совместимость при переливании, резус-фактор

Смена резус-фактора: за и против

Мнение «против» Резус-фактор относится к врожденным свойствам крови человека, передается по наследству и не изменяется в течение всей жизни.
Мнение «за» В 12% случаев существует риск изменения резус-фактора с отрицательного на положительный и наоборот. Но группа крови при этом остается прежней.

Сторонники версии смены резус-фактора аргументируют ее уникальным случаем, когда у 9-летней девочки после пересадки печени кровь I группы с отрицательным резус-фактором поменялась на кровь I группы с положительным резус-фактором. Анализы выявили, что кровяные стволовые клетки здоровой печени донора проникли в костный мозг девочки и повлияли на работу иммунной системы. Возможными причинами такой перемены в организме врачи считают молодость пациентки и пониженное количество лейкоцитов.

Если группы крови у мамы и папы разные

При разной группе у родителей вариантов передачи генов будет еще больше.

Лечение и профилактика резус-конфликта

При выявлении антител к резус-фактору в крови беременной рекомендуется инъекция антирезусного иммуноглобулина. При попадании в кровь этот препарат связывает антитела и выводит их. Для профилактики возникновения резус-конфликта рекомендуется на 28 неделе беременности сделать первую вакцинацию антирезусного иммуноглобулина. Вторая, она же заключительная, делается в течение 72 часов после родов. Однако если ежемесячный анализ крови не демонстрирует появление резус-антител, можно отложить вакцинацию до родов. В случае рождения ребенка с положительным резусом будущей маме обязательна инъекция иммуноглобулина. С отрицательным – необходимости в ней нет.

Выявление гена RHD плода в крови матери. Резус‑фактор плода

Генетический маркер, используемый для определения резус-фактора плода по фетальной ДНК. Анализ выполняется только с 10-й недели беременности при отрицательном резус-факторе беременной женщины.

Синонимы русские

Выявление наличия/отсутствия 7-го и 10-го экзонов гена RHD; генотипирование гена RHD по фетальной ДНК.

Синонимы английские

Fetal RHD genotyping test.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь беременной женщины с серологическим отрицательным резус-фактором с 10-й недели беременности.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Специальной подготовки не требуется.

Общая информация об исследовании

С точки зрения иммунологии беременность на всём протяжении рассматривается как процесс смены этапных иммунных конфликтов. В основном эти конфликты являются нормальными физиологическими процессами и не только не оказывают патологического воздействия на организм матери и плода, но и помогают нормальному течению беременности. С их помощью реализуются такие этапы беременности, как имплантация плода, формирование гормонального фона беременности и, конечно, сами роды. Кроме того, существует ряд патологических конфликтов, которые могут существенно осложнять течение нормальной беременности, иногда приводя к летальному исходу. Одним из них является резус-конфликт между матерью и плодом.

Система резус (Rh) — одна из самых полиморфных и иммуногенных систем, известных у людей; она представлена группой белковых молекул, расположенных на поверхностной мембране эритроцитов. Наиболее изученными белками (антигенами) этой группы являются антигены D, C, c, E и e, которые кодируются генами RHD и RHCE, расположенными на хромосоме 1. Наличие в геноме гена RHD приводит к появлению на эритроцитах антигена D, что соответствует резус-положительному фенотипу (Rh+). Резус-отрицательный фенотип (Rh-) формируется в результате отсутствия обоих гомологичных аллелей гена RHD.

Важнейший фактор возникновения резус-конфликта при беременности — формирование резус-положительного плода у резус-отрицательной матери. Несмотря на то что кровоток плода и матери разделены плацентой, фрагменты клеток и ДНК плода (фетальная ДНК) могут проходить через неё. Проницаемость плаценты может увеличиваться при ряде патологических процессов: гестоз, заболевания матки, прием лекарственных препаратов, соматическая патология и т.д. При попадании в кровь матери антигенов D плода на них вырабатываются резус-антитела (RhAb). Для матери они безвредны, но, проходя обратно через плаценту, они инициируют развитие гемолитической болезни плода и новорождённого путем связывания с эритроцитами плода и последующим их разрушением. Такие состояния являются фактором риска перинатальной смертности, что подчеркивает необходимость ранних диагностических и превентивных терапевтических стратегий сохранения жизнеспособности плода.

В настоящее время существует два основных метода определения резус-фактора. Первый метод – серологический – подразумевает выявление антигена D на поверхности эритроцитов с помощью специфических антител. Он подходит для широкого рутинного обследования. К существенным ограничениям этого метода относятся: 1) необходимость наличия для исследования живых эритроцитов, что делает невозможным использование его в пренатальной диагностике резус-фактора плода; 2) наличие мутации внутри гена RHD либо изменение уровня его экспрессии. В данных случаях серологическое исследование может дать ложноотрицательный результат (Rh- при наличии гена RHD), так как диагностические антитела не смогут связаться с поврежденными или отсутствующими молекулами антигена D.

Альтернативой серологическому исследованию резус-фактора служит генотипирование на наличие или отсутствие гена RHD. В случае пренатальной диагностики в качестве материала для исследования используется фетальная ДНК, выделенная из крови матери. Генотипирование проводится по нескольким фрагментам (7-й и 10-й экзоны) гена. Необходимое условие, увеличивающим специфичность данного метода, — его использование на сроках 10 и более недель беременности у серологически резус-отрицательных женщин. Основным методом генотипирования в данном случае является полимеразная цепная реакция, выявляющя наличие или отсутствие гена RHD в материале.

С учетом того что концентрация фетальной ДНК в крови матери крайне низкая, а также с учетом возможности наличия серологического ложноотрицательного резус-фактора у матери и наличия мутаций в гене RHD генотипирование резус-фактора плода проводят, исследуя ряд показателей: 1) наличие/отсутствие не менее двух фрагментов (7-й и 10-й экзоны) гена RHD; 2) с учетом сигнала от геномной ДНК матери.

Для чего используется исследование?

• Для прогнозирования развития резус-конфликта между резус-положительным плодом и резус-отрицательной матерью.
• Для решения вопроса о стратегии профилактики гемолитической болезни плода и новорождённого.

Когда назначается исследование?

C 10-й недели беременности.

Что означают результаты?

В процессе исследования формируется четыре типа заключения.

1. Отсутствие обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне достаточного количества сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется отрицательный резус-фактор плода у резус-отрицательной матери. Данное состояние не требует терапевтической коррекции.

2. Наличие обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне высокого количества сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется положительный резус-фактор плода у резус-отрицательной матери. Данное состояние может вызывать резус-конфликт (особенно при повторных беременностях) и требует терапевтической коррекции. Следует отметить, что у матери должен быть серологически подтвержденный отрицательный резус.

3. Наличие обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне равного количества сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется, возможно, положительный генетически резус-фактор у матери, резус-фактор плода идентифицировать не представляется возможным.

4. Наличие слабого сигнала обоих фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне слабого сигнала геномной ДНК. В этом случае констатируется сомнительный результат. Наличие слабого сигнала геномной ДНК, независимо от сигнала с обоих фрагментов гена RHD, либо наличие одного из двух фрагментов гена RHD в исследуемом материале на фоне высокого количества сигнала геномной ДНК указывает на недостоверный результат. Во всех этих случаях требуется проведение повторного исследования.

Что может влиять на результат?

• На получение достоверного результата может повлиять наличие у матери серологического ложно-отрицательного результата (Rh- при наличии гена RHD) вследствие наличия мутаций внутри гена RHD либо изменение уровня его экспрессии.
• Срок исследования менее 8-10 недель беременности.
• Малое количество фетальной ДНК, например при патологии плаценты.


Важные замечания

Данное исследование должно проводиться при каждой беременности у резус-отрицательной матери.

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, терапевт, гематолог, врач ОВП.

Литература

• Addai-Mensah O, Afriyie EY, Sakyi SA, Obirikorang C, Annani-Akollor ME, Owiredu EW, Amponsah FA, Duneeh RV, Asamoah Adu E. Fetal Rhesus D Genotyping and Sex Determination from Maternal Plasma of Rhesus D-Negative Antenatal Population: The Usefulness of Conventional Polymerase Chain Reaction in Resource-limited Settings. Obstet Gynecol Int. 2021 Oct 16;2020:4913793. doi: 10.1155/2020/4913793.
• Rather RA, Dhawan V, Saha SC. Non-invasive prenatal rhesus D genotyping using cell-free foetal DNA. Indian J Med Res. 2019 Jul;150(1):62-66. doi: 10.4103/ijmr.IJMR_1787_17.
• Arentz-Hansen H, Brurberg KG, Kvamme MK, Stoinska-Schneider A, Hofmann B, Ormstad SS, Fure B. Determination of Fetal Rhesus D Status from Maternal Plasma of Rhesus Negative Women. Oslo, Norway: Knowledge Centre for the Health Services at The Norwegian Institute of Public Health (NIPH); 2014 Dec. Report from Norwegian Knowledge Centre for the Health Services (NOKC) No. 25-2014.

Отрицательный резус не помеха рождению малыша

Большинство беременных с отрицательным резусом крови становятся мамами здоровых детей. Резус-конфликт наблюдается лишь у 0,8% будущих мам. Но и в этом случае при условии регулярной сдачи анализа на антитела и мониторинга состояния плода можно свести риски к минимуму.

Женщинам с отрицательным резусом крови инъекцию иммуноглобулина необходимо сделать в течение 72 часов как после родов, так и после случаев отслойки плаценты, амниоцетоза, самопроизвольного выкидыша, аборта, внематочной беременности и переливания крови.

Эксперт: Ирина Исаева, врач акушер-гинеколог Автор: Елена Нерсесян-Брыткова
В материале использованы фотографии, принадлежащие shutterstock.com