Алгоритмы для забора материала на бактериологические исследования

В документированной процедуре изложены правила сбора и транспортирования биологических материалов в лабораторию клинической микробиологии (бактериологии) ГОБУЗ “Мурманская областная клиническая больница им. П. А. Баяндина” в целях повышения качества результатов лабораторных исследований и организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, а также профилактики внутрибольничных инфекций у медицинского персонала и пациентов.

Документированная процедура предназначены для использования в МОКБ, а также может использоваться организациями, направляющими заказ на услугу по лабораторной диагностике.

Общие положения

Предложенная техника сбора и транспортирования биологических материалов в ЛКМ МОКБ позволит снизить уровень преаналитической ошибки и повысить качество работы лаборатории по объективизации результатов.

Документированная процедура определяет правила предохранения медицинского персонала и пациентов от инфицирования при сборе и доставке в лаборатории проб биоматериалов, которые могут быть обсеменены бактериями, грибами, вирусами, паразитами.

Общие требования к сбору проб биоматериала для микробиологического исследования

Материал для исследования собирают в достаточном количестве.

Материал должен соответствовать характеру инфекционного процесса.

При сборе материала необходимо использовать только стерильные инструменты и посуду, соблюдая правила асептики для исключения контаминации (загрязнения) биопробы нормальной микрофлорой, т.к. ее наличие приводит к ошибочной трактовке результатов.

При сборе биоматериала медперсонал обязан использовать средства индивидуальной защиты (далее — СИЗ) (перчатки, маска, шапочка, очки и др.).

Необходимо осуществлять сбор биоматериала только в рекомендуемые транспортные среды и контейнеры.

Материал для исследования, по возможности, собирают до начала антибактериальной терапии. При отсутствии такой возможности собирают, непосредственно, перед повторным введением (приемом) препаратов.

В бланке направления на исследование в обязательном порядке указывают наименование принимаемых антибактериальных препаратов.

Не допускается загрязнение наружную поверхность посуды при сборе и доставке проб.

Не допускается загрязнение сопроводительных документов (направлений).

При сборе биоматериала в пробирки, необходимо использовать штативы.

После взятия биоматериала, необходимо сделать запись о процедуре в бланке направления: дату, время взятия, другую информацию.

Правила маркировки проб биоматериала для микробиологического исследования

Все биопробы, поступающие в лабораторию должны пройти процедуру штрих-кодирования.

Наклейки, с нанесенными штрих-кодами, получают в централизованной многофункциональной лаборатории (далее ЦМЛ) МОКБ.

Цель штрих-кодирования — идентификация пациента (на пробирке (контейнере, флаконе) и на бланке должен быть одинаковый номер штрих-кода).

Штрих-код наклеивают на пробирку (контейнер, флакон) строго вертикально цифровой надписью сверху вниз, на имеющуюся наклейку. Необходимо оставить прозрачную зону для контроля состояния биопробы. Штрих-коды, наклеенные неровно, не будут считываться сканерами приборов.

Штрих-код должен быть наклеен ровно и плотно, строго вертикально (длинной стороной вдоль пробирки, контейнера) (рисунок 2).

При маркировке контейнера штрих-код наклеивается непосредственно на сам контейнер, на крышку маркировка не наносится.

Рекомендуется двойная маркировка — помимо штрих-кодирования, на емкость для сбора наносится краткая запись (номер, фамилия, уточнение локализации биоматериала и др.).

Выбор лент со штрих-кодами определяется количеством пробирок, контейнеров для исследований одного пациента, с учетом штрих-кодирования бланка направления (не менее 2-х штрих кодов на ленте: 1-й-на пробирку, 2-й на бланк).

Весь биоматериал маркируется двойными штрих-кодами.

Исключение для исследования:

(63037) «Микробиологическое исследование крови и других стерильных в норме жидкостей на микрофлору»

Необходимо использовать тройной штрих-код:

1 – направление-бланк на исследование

2 – аэробный флакон

3 – анаэробный флакон

Общие требования к условиям хранения проб биоматериала до доставки в лабораторию

Соблюдайте условия хранения биопроб до доставки в лабораторию (таблица 1).

Рекомендуется организовать в отделениях медицинской организации место хранения биопроб до их отправки в лабораторию (таблица 2).

Место хранения биопроб должно иметь маркировку знаком «Биологическая опасность».

Биопробы необходимо хранить в закрывающихся контейнерах, имеющих маркировку знаком «Биологическая опасность».

Регулярно проводите дез.обработку места хранения биопроб, контейнеров.

Сопроводительные документы (бланки направлений на исследования) помещают в пластиковый пакет (файл) для исключения контакта с биоматериалом.

Таблица 1

Общая характеристика

Культуральное исследование крови необходимо проводить всем тяжелобольным с лихорадкой, ознобом, в случае подозрения на эндокардит, внутрисосудистую инфекцию или иммуносупрессию. Причиной сепсиса или бактериемии, особенно у ослабленных больных, могут быть любые микроорганизмы, включая условно-патогенные и даже сапрофитные виды. Если обнаружение в крови патогенных микроорганизмов практически всегда свидетельствует об их этиологической значимости, то находки условно-патогенных и сапрофитных видов могут быть следствием контаминации крови в процессе ее взятия или случайного загрязнения посевов при дальнейшей работе с ними. Микроорганизмы, которые выделяются: Аэробы: стрептококки, стафилококки, энтеробактерии, неферментирующие, энтерококки.

Что показывает анализ крови на стерильность

Далеко не каждый пациент знает, для чего врачи в клиниках выписывают направления на разные обследования, в том числе это касается анализа крови на стерильность. Медики уверяют, что данное тестирование назначается для выявления у пациента бактериемии, которая свидетельствует о наличие патогенных процессов в организме. Чтобы получить достоверный результат и возможность начать грамотное лечение, пациенту необходимо знать правила забора крови и строго соблюдать некоторые рекомендации в течение нескольких дней.

Характеристика исследования

Посев крови на стерильность – что это такое и почему так называется? Данное обследование является одним из важнейших, поскольку дает медикам возможность выявить присутствие микроорганизмов в крови, которые свидетельствуют о развитии различных патологий, внутреннего воспалительного процесса. У здорового человека кровь и другие биологические жидкости должны быть стерильными, и если тестирование показывает обратный результат, это свидетельствует о наличии какого-то заболевания. Чтобы определить нарушение стерильности, чаще всего назначается гематологический посев на различные питательные среды.

Показания к проведению

Основная цель анализа – выявить наличие вредоносных микроорганизмов, провоцирующих воспалительный процесс.Диагност может назначить пациенту сдать кровь на микробиологическое исследование в следующих случаях

• если пациент страдает от специфической симптоматики, но медики длительное время не могут определить, что служит первоисточников патологического процесса;
• медик предполагает наличие септической инфекции у обследуемого;
• наличие осложнений, вызванных неграмотным хирургическим вмешательством;
• постановка катетера во внутренние органы на длительное время;
• человек периодически страдает от высокой температуры тела, но врачи не могут определить, что служит причиной такой реакции организма;
• наличие в организме импланта, напрямую контактирующего с биологическими средами организма.

Абсолютным показанием к поведению тестирования является наличие искусственных клапанов миокарда. Чтобы получить достоверный результат анализа, придется выждать не менее 10 суток, поскольку для прорастания патогенных микроорганизмов потребуется несколько дней.

Специалисты предупреждают, что скорость этого процесса зависит от типа возбудителя. Стоит отметить, что после забора биоматериала многим пациентам назначают прием антибиотиков (исходя из присутствующей симптоматики), но подобрать более грамотную и оптимальную схему лечения возможно только после получения данных гемотеста.

Что позволяет выявить тестирование В большинстве случаев бакпосев на стерильность назначается для обнаружения в крови вредоносных бактерий и микробов, таких как:

Тестирование крови

• стафилококки;
• стрептококки;
• дрожжевые грибки;
• плесневые споры;
• энтеробактерии.

Данное исследование является необходимым для пациентов, у которых снижены защитные силы организма, а также для людей, страдающих от опасных патологий, таких как ВИЧ, туберкулез, острые инфекционные заболевания. Кроме того, тестирование зачастую назначается, если медики не могут определиться с оптимальной схемой лечения.

Какие заболевания помогает выявить посев. Тестирование на присутствие патогенных микроорганизмов позволяет определить наличие следующих патологий:

Сепсис.

1. Менингит.
2. Пиодермия.
3. Эндокардит.
4. Остеомиелит.

Чтобы обнаружить тип гемокультуры, требуется провести тщательный анализ предполагаемого возбудителя. Если исследование покажет присутствие его в организме, медикам потребуется выяснить, насколько серьезную опасность обнаруженные микробы представляют для различных систем и внутренних органов.

Где можно провести тестирование Если человеку необходимо провести подобное исследование, лучше записаться на прием в частный диагностический центр. Главное условие – наличие там лаборатории для микробиологических исследований.Как показывает практика, в подобных учреждениях расшифровка результатов проводится в кратчайший срок. Стоимость процедуры может отличаться в зависимости от типа клиники, но обычно цена тестирования варьируется в пределах 400-700 рублей.

Особенности подготовки Поскольку бакпосев – микробиологическое исследование, на достоверность результата могут повлиять внутренние и внешние факторы.Чтобы предотвратить получение ложного результата, пациенту требуется выполнить определенную подготовку:

за трое суток до сдачи биологического материала категорически запрещено употреблять алкогольную продукцию и медикаменты (вне зависимости от фармкатегории);

• в течение 72 часов до анализа не рекомендуется употреблять жирную, пережаренную пищу и блюда с большим количеством приправ, специй;
• за 3 часа до забора крови запрещено курить.

Если пациент будет игнорировать правила, вероятность получения неправильного результата анализа увеличивается в несколько раз, что может стать причиной необходимости вторичного тестирования. Есть противопоказания. Посоветуйтесь с врачом.Запись на ПЭТ-КТ диагностику!

Осуществление процедуры у взрослых Алгоритм действий очень простой, но важнейшим моментом является соблюдение техники забора. Биоматериал требуется забирать строго из вены локтевого сгиба. Медик должен следить, чтобы в кровь не попали внешние загрязнители.

Чтобы предотвратить порчу биоматериала, забор крови осуществляется одноразовой стерильной иглой.Прежде чем приступить к нему, участок эпидермиса необходимо обработать антисептическим раствором. В большинстве случаев у пациента забирают около 10 мл биоматериала, после чегопомещают во флакон с питательной средой, которая предотвращает изменение структуры крови.

Чтобы снизить риск заражения, кровь из шприца переливают во флакон, находящийся над пламенем горелки. После этих действий пузырек закупоривают плотной крышкой и помещают в специальный контейнер до осуществления дальнейших исследований. В редчайших случаях пациенту перед забором крови вводят адреналин, поскольку вещество увеличивает точность анализа и помогает проявить максимальное количество возбудителей.

Анализ у детей У ребенка манипуляции с кровью осуществляются иначе. Изъятие биоматериала проводится только из пальца либо пятки. У детей для бакпосева на стерильность забирают не более 5 мл крови.

Как долго ждать результата?

Сколько времени готовится анализ, интересует всех пациентов. Если процедура осуществлялась в современном диагностическом центре, первые данные можно получить уже через пару суток, но бланк с окончательными результатами пациенту отдадут на руки не ранее чем через 10 дней. Это обусловлено тем, что кровь будет подвергаться различным исследованиям, в биоматериал будут добавлять различные реагенты и вещества.

Точность исследования

Врачи уверяют, что данное тестирование дает гарантированно правильный результат и возможность оценить общее состояние пациента, выявить наличие определенных патологий. Недостоверные данные могут появиться только в том случае, если пациент игнорировал врачебные рекомендации и правила подготовки перед сдачей биоматериала. При соблюдении всех требований вероятность того, что человек получит достоверные сведения о своем состоянии, достигает 95%.

Какие выводы можно сделать после анализа

На сегодняшний день тестирование на стерильность является незаменимым, поскольку дает возможность оценить гемокультуру крови и провести исследование с применением различных патогенных организмов. Кроме того, в ходе исследования можно узнать, как организм отреагирует на потребление тех или иных препаратов, благодаря чему врачи смогут подобрать наилучшую схему лечения. Если у человека периодически повышается температура тела без видимых причин, необходимо не раздумывая записаться на прием к специалисту, который после проведения физиологического осмотра и сбора анамнеза выпишет направление на дальнейшую диагностику. Нельзя исключать вероятность, что одним из первых в списке будет значиться исследование крови на стерильность, поскольку на основании этого тестирования можно сделать выводы об общем состоянии пациента и назначить грамотную схему терапии.

Автор: : Алшериева Куралай Курманалиевна

заведующая бактериологической лабораторией

Областного медицинского центра.15.02.2019г

Показания для назначения

1. Cостояния и инфекционные (бактериального происхождения) заболевания, сопровождающиеся многократными подъемами температуры, когда возбудитель циркулирует в крови. 2. Пациенты после хирургических вмешательств, с патологией сердечно-сосудистой системы, имеющие сосудистые катетеры, искусственные клапаны сердца и кардиостимуляторы.3. Бактериемия при инфекционных эндокардитах, остеомиелитах, артритах, менингитах, пневмониях, интраабдоминальных инфекциях, инфекциях кожи, мягких тканей и мочевыводящих путей.

Кому необходимо пройти анализ?

Снижение иммунитета и лихорадка могут свидетельствовать о развитии инфекционной болезни. Поэтому люди, которые чувствуют резкий упадок сил, сопровождающийся постоянными скачками температуры, должны пройти анализ на стерильность.

Тестирование необходимо в некоторых конкретных случаях:

• плохое самочувствие пациента;
• снижение иммунитета;
• подозрение на туберкулез;
• подозрение на сепсис или менингит;
• стабильно высокая температура тела;
• неэффективное лечение антибиотиками;
• пациент является донором крови.

Если человек является донором, то ему обязательно нужно пройти данный анализ, чтоб не заразить реципиента. Инфекции, которые передаются через кровь – очень стойкие, поэтому вероятность того, что при переливании они передаются – очень высока.

Интерпретация:

• 1. При случайной контаминации крови чаще всего выделяются микроорганизмы, входящие в состав нормальной микрофлоры кожи или широко распространенные в окружающей среде: Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium spp., Bacillus spp. и др. Причиной сепсиса они бывают, как правило, только у больных со сниженной резистентностью.2. Одновременное выделение из крови нескольких видов микроорганизмов чаще всего свидетельствует о случайном загрязнении крови, но у больных со сниженной резистентностью возможна смешанная инфекция.3. На этиологическую значимость микроорганизма указывает• его неоднократное выделение из крови или одновременное выделение из крови и других видов исследуемого материала;• быстрое, в течение 48 часов обнаружение микроорганизма. Приблизительно 65% посевов крови от больных с бактериемией дают положительный результат в первые 24 ч культивирования, а 90% в течение 3 сут.

Образец результата (PDF)

Рекомендации по организации места хранения биопроб до доставки в лабораторию

Общие требования к доставке проб биоматериала для микробиологического исследования

Доставка проб биоматериала осуществляется в рабочие дни и время ЛКМ (бактериологии), согласно режиму доставки в ЛКМ.

Исключение составляет круглосуточный прием от отделений МОКБ следующих биоматериалов:

Пробы ликвора — для проведения реакции латекс-агглютинации и бактериологического посева.

Пробы крови — для посева на стерильность.

Собранный материал доставляют в лабораторию в рекомендуемые сроки (таблица 1).

Доставка биоматериала осуществляется курьером.

Не допускается доставка биоматериала пациентами.

Для доставки биоматериала необходимо использовать закрывающиеся контейнеры, биксы или сумки-холодильники, обязательна маркировка знаком «Биологическая опасность».

Не допускается доставка биоматериала в руках, карманах, хозяйственных сумках и других предметах личного пользования.

Дно контейнеров должно быть покрыто сухим адсорбирующим материалом (марлевая салфетка, ткань, вата и пр.).

Доставляемые емкости с биоматериалами должны быть закрыты пробками, крышками, исключающими выливание содержимого во время транспортирования.

Доставка жидкого биоматериала осуществляется строго в вертикальном положении, в штативах.

Сопроводительные документы (бланки направлений на исследования) помещают в непромокаемый пакет (файл, папка) для исключения контакта с биоматериалом.

Разбор доставленного биоматериала должен проводиться с соблюдением мер предосторожности. Емкости с биоматериалами должны помещаться на поднос или лоток. Персонал должен использовать средства индивидуальной защиты (резиновые перчатки, маску).

Таблица 1

Расшифровка результатов

Уровень стерильности крови, составляющий менее 100%, может означать наличие бактериемии. Чем больше обнаруживается патогенных бактерий, тем обширнее их активность во всем организме. При этом они обнаруживаются и в таких биологических материалах, как моча, мокрота.

Наибольшая точность получается при параллельном культивировании микроорганизмов в разных субстратах.

Бак-посев может определять как тип болезнетворного возбудителя, так и стадию поражения организма инфекцией:

1. Первая стадия инфицирования показывает, что в плотном субстрате бактерии отсутствуют, а в жидкой наблюдается их минимальное количество.
2. Вторая определяется, если в плотном субстрате лаборантом выявлено 5-8 колоний.
3. Третья обусловлена наличием бактерий в плотном субстрате в объеме до 100 колоний.
4. Соответствующим показателем для постановки четвертой стадии будет обнаружение колоний в количестве, превышающем 100 штук.

Как подготовиться к анализу?

Процедура проводится в лабораторных условиях. Медики, посредством посева крови на определенную среду, могут увидеть, есть ли у вас в организме бактерии, и насколько быстро они размножаются. Также определяются виды бактерий. Для того, чтобы сдать кровь на стерильность, необходимо придерживаться всего нескольких правил. Во-первых, не пить алкоголь и не есть жирную пищу. Во-вторых, не курить. Данные рекомендации необходимо соблюдать хотя бы за несколько дней до процедуры. От курения стоит отказаться за несколько часов до сдачи анализа крови.

Также пациентам следует воздержаться от приема пищи хотя бы за восемь часов до процедуры. Кровь сдают с утра на голодный желудок, так как это значительно увеличивает шансы достоверности результатов тестирования. Анализы будут готовы в течение примерно недели (для доноров срок проверки может быть дольше).

Через сколько времени готов результат

Примерно через 3 дня исследуемый человек может узнать о стерильности своей крови. Уже через несколько суток врачи могут сказать о наличии бактерий и их примерном количестве.

Точный окончательный результат готов примерно через 10 дней. За это время специалисты «выращивают» инфекционных возбудителей в специальных чашках. Также в течение этого срока изучается устойчивость бактерий и грибков к различным антибиотикам.

Процесс бактериологического посева

Во время бактериального посева, кровь помещают на питательную культуру, благодаря которой бактерии начинают активно размножаться и «строить» колонии.

В качестве питательных сред могут использоваться следующие вещества:

• агар из казеина или сыворотки;
• яичная среда;
• бульон из агара и крови животных.

Питательная среда может быть двух видов:

1. Жидкая среда. Используется при небольшом количестве бактерий. В качестве инструмента используются пробирки.
2. Плотная среда. Используется при большом количестве бактерий и грибков. В качестве инструмента используется чашка Петри. Она представляет собой тщательно стерилизованную стеклянную или пластиковую круглую плоскую чашу.

В питательную среду исследуемый материал помещается с помощью стеклянных или металлических игл, а также специальных приборов, которые называются бактериальной петлей. Для подсчета количества бактерий в крови используется обозначение КОЕ – количество единиц (микроорганизмов) в миллилитре крови, которые способны образовать колонию.

Существуют следующие степени роста:

1. Первая степень. В плотной структуре колонии отсутствуют полностью, наблюдается их мизерное количество в жидкой среде.
2. Вторая степень. В плотной среде появляется 5-8 колоний.
3. Третья степень. В плотной среде можно сосчитать до 100 колоний.
4. Четвертая степень. В среде насчитывается более 100 колоний микроорганизмов.

При первой и второй степени незначительное количество бактерий может говорить о нарушении правила забора крови и недостаточной стерильности. Приметой загрязнения материала и оборудования может стать и смешенный результат, когда вырастают колонии разных видов бактерий.

Достоинством бактериального посева является возможность проведения антибиотикограммы. Это метод изучения устойчивости бактерий к тем или иным антибиотикам.

Для этого могут применяться следующие методы:

1. Метод смешенных дисков. В среду с бактериями помещаются диски, пропитанные разными антибиотиками. По зонам задержки роста и уменьшению колонии можно судить о чувствительности микроорганизмов к лекарству.
2. Е-тест. Методика такая же, как и выше, но вместо дисков используются бумажки с разной концентрацией одного и того же антибиотика.