Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам

Основным компонентом лечения воспалительных заболеваний органов малого таза (ВЗОМТ) являются антибиотики. Решение вопроса адекватности и своевременности антибактериальной терапии стоит наиболее остро и нередко является жизнеобеспечивающим [1, 2].

Сложность решения данного вопроса обусловлена рядом факторов:

— многообразием этиологически значимых возбудителей (микстинфекции) ВЗОМТ;

— необходимостью использования антибиотиков широкого спектра действия или чаще комбинации антибиотиков;

— эмпиризмом начальной терапии;

— часто нерациональным применением антибиотиков и ростом вследствие этого резистентности возбудителей [2, 3].

Многообразие современных антибиотиков обеспечивает достаточные возможности их выбора, однако в основе адекватной терапии должны лежать прежде всего доказанные в ходе контролируемых клинических исследований эффективность и безопасность применения антибиотиков и обязательно данные о резистентности к ним возбудителей заболевания [1-3].

На основании вышеизложенного целью нашего исследования было изучение чувствительности микробной флоры цервикального канала к антибактериальным препаратам у пациенток с ВЗОМТ.

Материал и методы

Проведено изучение чувствительности микробной флоры цервикального канала к антибактериальным препаратам у 501 пациентки с хроническими ВЗОМТ в возрасте от 18 до 35 лет, обратившейся к гинекологу с жалобами на патологические выделения из влагалища, боли ноющего характера внизу живота и поясничной области, отсутствие беременности. Данная категория пациенток была включена нами в основную группу (ОГ). Контрольную группу (КГ) составили 84 пациентки в возрасте от 20 до 35 лет, обратившиеся к гинекологу для профилактического осмотра и подбора метода контрацепции. Результаты микроскопии мазков у пациенток КГ свидетельствовали о наличии у них II степени чистоты влагалищного содержимого.

Верификация диагноза у пациенток ОГ была основана на данных клинического, лабораторного (бактериоскопическое, бактериологическое исследования, ПЦР-диагностика, анализы крови) и инструментального (УЗИ органов малого таза, компьютерная томография) обследований, а также на результатах лапароскопии с данными морфологического исследования. Полученные результаты свидетельствуют о том, что у всех пациенток имели место ВЗОМТ, а также цервицит, вагинит.

Бактериологический метод (тест-системы, посев на 5% кровяной питательный агар и среды накопления) включал качественное и количественное выделение и идентификацию микроорганизмов из отделяемого цервикального канала с целью определения их чувствительности к антибиотикам. У всех выделенных микробных агентов определяли чувствительность к антибиотикам дискодиффузионным методом. Исследование проводилось до начала приема антибактериальных препаратов. Кроме этого, учитывался интервал после приема антибиотиков (более 6 нед).

Результаты проведенных исследований были подвергнуты статистической обработке с вычислением средней арифметической величины (М),

ошибки средней
(m)
и достоверности различия между показателями (p) с учетом достоверной вероятности по критерию Стьюдента-Фишера.

Результаты и обсуждение

Изучение результатов бактериологического исследования отделяемого цервикального канала (табл. 1)

Число микробных ассоциаций (бактериально-бактериальных и бактериально-грибковых) при обследовании бактериологическим методом пациенток ОГ составило 29,94±2,05% (150 случаев). В микробные ассоциации входили Ureaplasma urealyticum

— 42 (8,38±1,24%),
E. coli
— 36 (7,19±1,15%),
Candida albicans
— 32 (6,39±1,09%),
Staphylococcus haemolyticus
— 17 (3,39±0,81%).

Результаты определения чувствительности микробной флоры цервикального канала к антимикробным препаратам у пациенток с хроническими ВЗОМТ представлены в табл. 2.

Среди цефалоспоринов высокая чувствительность E. coli haemolyticus

была выявлена к цефтазидиму (p<0,001).

У других представителей грамотрицательной флоры (Klebsiella, Proteus mirabilis)

высокая степень чувствительности была выявлена к норфлоксацину (p<0,001) и цефтазидиму (p<0,001). Кроме этого, высокая чувствительность у
E. coli haemolyticus
(p<0,01) и у
Klebsiella
(p<0,001) была отмечена к гентамицину.

Анализ чувствительности грамположительных кокков показал (см. табл. 2),

что высокая чувствительность (более 50%), по сравнению с таковой к другим макролидам, к азитромицину отмечена у
Staphylococcus
spp. (азитромицин/кларитромицин, p<0,05; азитромицин/рокситромицин, p<0,001; азитромицин/спирамицин, p<0,001) и
Streptococcus
spp. (азитромицин/джозамицин, p<0,001; азитромицин/кларитромицин, p<0,001; азитромицин/рокситромицин, p<0,001); к джозамицину — у
Staphylococcus
spp. (джозамицин/кларитромицин, p<0,05; джозамицин/рокситромицин, p<0,001, джозамицин/спирамицин, p<0,001) и
Enterococcus faecalis
(джозамицин/азитромицин, p<0,001, джозамицин/рокситромицин, p<0,001).

Среди грамположительных кокков наиболее высокая чувствительность (см. табл. 2)

к фторхинолонам была отмечена у
Enterococcus faecalis
к моксифлоксацину: достоверно выше, чем к другим фторхинолонам (p<0,001), а также к азитромицину (p<0,001) и джозамицину (p<0,05).

Чувствительность Staphylococcus

spp. к офлоксацину (p<0,001) была аналогична таковой к азитромицину и джозамицину, но наиболее высокой по сравнению с чувствительностью к моксифлоксацину (p<0,01), спарфлоксацину (p<0,001), ципрофлоксацину (p<0,001).

Наиболее высокая чувствительность Streptococcus

spp. к препаратам из группы фторхинолонов была зафиксирована к офлоксацину; тем не менее данный показатель был достоверно ниже, чем чувствительность к азитромицину (p<0,05).

Высокая чувствительность Staphylococcus

spp. и
Streptococcus
spp. была отмечена к амоксициллин клавуланату. Данный показатель для
Staphylococcus
spp. был достоверно выше, чем показатель чувствительности к азитромицину (p<0,001), джозамицину (p<0,001), офлоксацину (p<0,001). Чувствительность
Streptococcus
spp. к амоксициллин клавуланату была такой же высокой, как и к азитромицину, но достоверно превышала аналогичный показатель для джозамицина и других макролидов (p<0,001), а также для офлоксацина и других фторхинолонов (p<0,001).

По данным наших исследований, чувствительность грамположительных кокков (см. табл. 2)

к цефалоспоринам была достоверно низкой по сравнению с таковой к макролидам (p<0,001), фторхинолонам (p<0,001), ингибиторозащищенным пенициллинам (p<0,001).

Изучая чувствительность представителей класса Mollicutes
(см. табл. 2),
мы получили данные, свидетельствующие о том, что чувствительность
Ureaplasma urealyticum
была достоверно высокой к джозамицину (p<0,001), спирамицину (p<0,001), доксициклину (p<0,001) по сравнению с таковой к другим макролидам, фторхинолонам.

Чувствительность Mycoplasma hominis

была достоверно высокой к джозамицину (p<0,001) по сравнению с этим показателем к другим макролидам, фторхинолонам, доксициклину.

Таким образом, нами было выявлено, что по данным батериологического исследования микробные ассоциации составили 29,94±2,05%. В микробные ассоциации входили Ureaplasma urealyticum, E. coli, Staphylococcus haemolyticus.

С практической точки зрения важно снижение диагностического порога ВЗОМТ для начала эмпирического лечения, так как любая отсрочка в диагностике и лечении повышает частоту развития поздних осложнений [1, 4].

По мнению ряда исследователей, схемы лечения ВЗОМТ должны обеспечивать элиминацию широкого спектра возможных возбудителей. В то же время следует предполагать возможную резистентность микроорганизмов к традиционным антибиотикам. При госпитализации лечение целесообразно начинать с парентерального пути введения препаратов и затем переходить на пероральные формы [5-7].

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что наиболее высокая чувствительность у грамотрицательных бактерий, грамположительных кокков, представителей класса Mollicutes

была отмечена к азитромицину и джозамицину по сравнению с другими группами антибактериальных препаратов. Результаты исследования следует учитывать при эмпирическом назначении антибактериальных препаратов, особенно в гинекологических стационарах, у пациенток с острым течением или обострениями ВЗОМТ.

Выводы

1. Наиболее высокая чувствительность у грамотрицательных бактерий, грамположительных кокков, представителей класса Mollicutes

была отмечена к азитромицину и джозамицину по сравнению с другими группами антибактериальных препаратов.

2. Приоритетным является парентеральное назначение азитромицина с последующей коррекцией и подбором индивидуальной антимикробной терапии после получения результатов, определяющих чувствительность микробной флоры к антибиотикам.

Как берут посев из цервикального канала?

Анализ проводят микроскопией материала на 4-5 день менструального цикла. Для мазка, шейку матки обнажают с помощью зеркала. Стерильным тампоном или щёточкой собирают слизь с поверхности эпителия, проворачивая несколько раз по часовой стрелке, стараясь не повредить оболочку.

Выводят щеточку и полученный материал распределяют равномерным слоем на предметном стекле, избегая подсушивания. Стекло помещают в индивидуальный пакет и отправляют в лабораторию.

Все время проведения процедуры забора материала для исследования составляет 15 минут.

Если требуется транспортировка материала, то ее производят только при температуре не выше 20 градусов в герметичной сумке – холодильнике. В лабораторных условиях условно-патогенный материал помещают в благоприятную, для их размножения среду.

Для каждого типа бактерий требуются индивидуальные условия и время размножения. Результаты по окончанию процесса записывают лабораторные сотрудники. Расшифровку проводит гинеколог.

Обратите внимание! Бак посев из цервикального анализа не выявляет наличие таких инфекций, как: герпевирус, уреаплазма, микоплазма, хламидии (проникающих в клетки и поражающих ядро). Данный вид микроорганизмов способна выявить ПЦР – диагностика (полимеразная цепная реакция).

Как подготовиться к мазку из цервикального канала?

Правильная подготовка к безболезненной процедуре обеспечивает получение достоверных результатов. Врач выписывает направление пациентке и рассказывает о нюансах, которые необходимо учесть перед сдачей.

У беременной женщины анализы принимает врач – гинеколог. В течение нескольких дней перед процедурой избегают половых контактов. Не принимают лекарственные препараты и противозачаточные средства.

Если за несколько дней до назначенной даты сдачи проводились исследования влагалища с помощью зеркала, то процедуру целесообразно отложить. Запрещено делать спринцевания, искажающие показатели микрофлоры влагалища. Для соблюдения гигиены использовать обычную кипяченую воду без применения моющих средств.

Перед посещением процедурного кабинета подмываются только вечером. За 1-2 часа до приема воздерживаются от мочеиспускания. Проведение процедуры не приносит дискомфорта и болевых ощущений пациентке.

Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам

Это микробиологическое исследование, позволяющее определить качественный и количественный состав микрофлоры исследуемого биоматериала, в том числе выявить условно-патогенные микроорганизмы в высоком титре и патогенные микроорганизмы, определить их чувствительность к антибиотикам.

При обнаружении микробиологическим методом микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору, или условно-патогенных микроорганизмов в титре менее диагностического не определяется чувствительность к антибиотикам и бактериофагам, так как это количество не является значимым и не требует лечения противомикробными препаратами.

Исследуется аэробная микрофлора.

Синонимы русские

Бактериологический посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам.

Синонимы английские

Culture, routine. Bacteria identification and antibiotic susceptibility testing.

Метод исследования

Микробиологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Разовую порцию мочи, урогенитальный мазок (с секретом предстательной железы), мокроту, мазок из ротоглотки, грудное молоко, мазок из носоглотки, эякулят, отделяемое уха, мазок с конъюнктивы, мазок из носа, синовиальную жидкость, мазок из цервикального канала, мазок из уретры, отделяемое абсцесса полости рта, плевральную жидкость, ликвор, смыв из бронхов, желчь, экссудат, биоптат, содержимое желчного пузыря.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Рекомендуется употребить большой объём воды за 8-12 часов до сбора мокроты.
• Исключить приём мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
• Женщинам рекомендуется сдавать урогенитальный мазок или мочу до менструации или через 2 дня после её окончания.
• Мужчинам не следует мочиться в течение 3 часов до сдачи урогенитального мазка или мочи.
• Не чистить зубы в день взятия биоматериала на исследование.

Общая информация об исследовании

Нормальная микрофлора человека представляет собой совокупность микроорганизмов, населяющих кожу и слизистые оболочки. Наибольшее их количество (около 40 %) обитает в желудочно-кишечном тракте, остальная часть – на кожных покровах, зеве, глотке, в мочеполовой системе и др. Нормальная микрофлора подразделяется на постоянную (составляет до 90 % присутствующих в организме микробов), факультативную (менее 10 %) и случайную (не более 0,5 %).

По способности вызывать инфекционные заболевания микроорганизмы классифицируют на непатогенные (не вызывающие заболевания), условно-патогенные (в норме могут выделяться в небольших количествах и при определённых условиях активно размножаются, приводя к воспалению) и патогенные (являются возбудителями инфекционных заболеваний и в составе нормальной микрофлоры не обнаруживаются).

Бактериологическое исследование (посев на флору) позволяет определить качественный и количественный состав микрофлоры исследуемого клинического материала, в том числе выявить патогенные микроорганизмы. При обнаружении условно-патогенных микроорганизмов в высоком титре или патогенных микроорганизмов определяется их чувствительность к антибиотикам и бактериофагам.

Для чего используется исследование?

• Чтобы установить возбудителя инфекционного заболевания.
• Для подбора рациональной антимикробной терапии.
• Чтобы оценить эффективность проводимой терапии.

Когда назначается исследование?

При воспалительных заболеваниях различных локализаций (за исключением воспалительных заболеваний кишечника).

Что означают результаты?

Референсные значения для различных видов микроорганизмов зависят от их локализации (точки взятия биологического материала).

Что может влиять на результат?

Предшествующая противогрибковая или антибактериальная терапия.

Также рекомендуется

• Посев на флору с определением чувствительности к бактериофагам
• Бактериологическое исследование клинического материала на анализаторе VITEK bioMerieux с определением чувствительности к антибиотикам

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, педиатр, хирург, ЛОР, пульмонолог, уролог, гинеколог, дерматовенеролог, офтальмолог.

Литература

• Chernecky С.С. Laboratory tests and diagnostic procedures / С.С. Chernecky, B.J. Berger ; 5th ed. – St Louis : Saunders Elsevier, 2008. – 1232 p.
• Gill V.J., Fedorko D.P., Witebsky F.G. The clinician and the microbiology laboratory. In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., R. Dolin (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.
• Levinson W. Medical microbiology and immunology: examination and board review (Lange medical books series) / W. Levinson ; 8th ed. – NY : McGraw-Hill, 2004. – 654 p.